產(chǎn)品中心
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨號 |
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索氏(shì)梭狀(zhuàng)芽(yá)孢杆(gān)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒 |
Clostridium sordelliiPCR |
YS-P014037 |
分類(lèi):PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲存條(tiáo)件(jiàn):-20℃避光(guāng)保存,避(bì)免反復凍(dòng)融。
運輸:低溫,避光。
有效期:一年
貨期:現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有效期一般為(wéi)1年(nián),這是(shì)指在(zài)適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分(fēn)的(dí)試(shì)劑一般要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià),產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部分試劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復凍融(róng)。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將(jiāng)閾(yù)值綫設定在(zài)剛(gāng)好超過(guò)正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲綫的最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性,有明顯的(dí)指數擴增期,Ct值應小於(yú)等(děng)於35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在一(yī)次(cì)實驗中同時滿足,否(fǒu)則(zé)該(gāi)次(cì)實(shí)驗視為無效。
2.可疑:有(yǒu)明顯的指數擴(kuò)增期,且(qiě)38≤Ct<40,此時樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑(yí)樣本;對於(yú)可疑樣本(běn)建議復核(hé)一次,若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增期,則判定(dìng)為(wéi)陽性,否則判定為陰性(xìng);
3. 陰性:無指數擴增期,Ct=40或無Ct值均判定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境汙染(rǎn),試劑汙(wū)染,樣品交叉汙染會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽性(xìng)結果;
2. 試劑(jì)運輸(shū),保存不當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不準確引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效能(néng)下降,可能會導致出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結果。
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則(zé);
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應的(dí)忠實(shí)性(xìng);
④靶基因的特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守性。
索(suǒ)氏梭狀(zhuàng)芽(yá)孢杆(gān)菌(jūn)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確(què)結合是(shì)關鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則的(dí)。聚合(hé)酶合(hé)成反應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫性(xìng),使反應中模(mó)板與引物的結合(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的(dí)溫度下(xià)進行,結合(hé)的特(tè)異(yì)性大大增加,被擴(kuò)增(zēng)的靶基因片(piàn)段也就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特異性和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區(qū),其特(tè)異(yì)性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成量是(shì)以指數方式增加(jiā)的,能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測模板擴(kuò)增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢出一個靶(bǎ)細胞(bāo);在病毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng),PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單(dān)位);在細(xì)菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便,快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一次性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後,即在DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行變性(xìng)-退火-延伸反(fǎn)應,一(yī)般(bān)在(zài)2~4 小時完成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物一般用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析(xī),不一定要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù),無放(fàng)射(shè)性汙染(rǎn),易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度要(yào)求(qiú)低(dī)
不需(xū)要(yào)分離(lí)病毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培養細胞(bāo),DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標本如(rú)血液,體(tǐ)腔液(yè),洗嗽液,毛(máo)發,細(xì)胞,活(huó)PCR技(jì)術概論。
