產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑(jì)盒
商品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
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敗血(xiě)梭(suō)狀(zhuàng)芽胞杆菌PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
Clostridium septicumPCR |
YS-P014036 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存，避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期(qī)：一年
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有效期(qī)一般為1年，這是(shì)指在(zài)適當的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸擴增部分的試劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物檢測部(bù)分試劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性質控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質控(kòng)品的檢測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求需在一次實驗中同時滿足(zú)，否(fǒu)則該次(cì)實驗視(shì)為無效(xiào)。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可疑：有明(míng)顯的(dí)指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可疑樣本；對(duì)於可疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次，若復(fù)核結果Ct<40且有指數擴(kuò)增期，則判(pàn)定為(wéi)陽性，否則判(pàn)定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室環(huán)境汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙染，樣品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存(cún)不(bù)當或(huò)試劑(jì)配製(zhì)不準(zhǔn)確引起的(dí)試劑檢測效能下降，可能(néng)會導致出(chū)現假(jiǎ)陰性結果。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反應的(dí)忠實性；
④靶基(jī)因的(dí)特異(yì)性與保守性(xìng)。
敗血梭(suō)狀芽胞(bāo)杆菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正確結合是(shì)關鍵。引物與模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基配對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚合酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反應中模(mó)板與(yǔ)引物(wù)的(dí)結合(復性)可(kě)以(yǐ)在較高的溫度下進行，結合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性大大(dà)增加，被擴增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段也(yě)就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的正(zhèng)確(què)度。再通過(guò)選(xuǎn)擇特異性和保(bǎo)守(shǒu)性高的靶基因區(qū)，其特(tè)異性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是以指數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待測模板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位)；在細菌學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一次(cì)性地將(jiāng)反應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴增液(yè)和水浴鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng)，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完(wán)成擴增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不一定要用同(tóng)位素，無(wú)放射(shè)性汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度(dù)要求低
不(bù)需(xū)要分離病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及培養細胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可作為擴(kuò)增(zēng)模板。可直接用臨(lín)床(chuáng)標本如血(xiě)液，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發，細(xì)胞，活PCR技術概(gài)論(lùn)。
