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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品名稱 | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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波(bō)薩(sà)達(dá)斯(sī)球孢(bāo)子(zǐ)菌PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Coccidioides posadasiiPCR |
YS-P014041 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避(bì)免反復(fù)凍融。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有效(xiào)期：一年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試(shì)劑盒的有效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為1年，這(zhè)是指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑一般(bān)要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部(bù)分試劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結果分析(xī)條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好超過(guò)正常陰性質控(kòng)品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需在一次(cì)實驗中(zhōng)同時滿足，否(fǒu)則(zé)該次實驗視為無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑樣本；對於可(kě)疑樣(yàng)本建議(yì)復核(hé)一(yī)次，若復核結果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增期，則判定為陽(yáng)性，否則判(pàn)定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙染，試(shì)劑(jì)汙染，樣品(pǐn)交叉汙染會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存(cún)不(bù)當或(huò)試劑配製不(bù)準確(què)引起的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效(xiào)能下降(jiàng)，可能會(huì)導致出現假陰性結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因的(dí)特異性與保(bǎo)守性(xìng)。
波薩(sà)達斯球孢(bāo)子(zǐ)菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模(mó)板的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引物(wù)與模板的(dí)結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延伸是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原則的(dí)。聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結(jié)合(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫度(dù)下進行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異性大(dà)大增加(jiā)，被擴增的靶(bǎ)基因(yīn)片段也(yě)就(jiù)能(néng)保持(chí)很(hěn)高的正確(què)度。再通過(guò)選擇(zé)特(tè)異性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶基因(yīn)區(qū)，其(qí)特(tè)異性程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量是以指數方式增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在病毒(dú)的檢測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單(dān)位)；在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地將反應(yīng)液(yè)加好後(hòu)，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行(háng)變性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng)，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時完成擴增(zēng)反應。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般(bān)用電泳分(fēn)析，不一定要用(yòng)同位素，無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推廣。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度要(yào)求低
不(bù)需要分離(lí)病毒或細菌(jūn)及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均(jūn)可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛(máo)發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
