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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產品名(míng)稱 | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨號 |
|
球孢子(zǐ)菌(jūn)通用PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
Coccidioidesspp.PCR |
YS-P014042 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避免反復凍融。
運輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般為1年，這(zhè)是指在適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫度(dù)下。核(hé)酸擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
【結果分(fēn)析條件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛(gāng)好超過正常(cháng)陰(yīn)性質控品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品的檢測結(jié)果應為(wéi)陽性，有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需(xū)在一(yī)次實驗中(zhōng)同時滿足，否則該(gāi)次實(shí)驗視為(wéi)無效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑樣本(běn)；對於可(kě)疑樣本建議復核(hé)一次，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且有指數擴增(zēng)期，則判定(dìng)為陽性，否則判(pàn)定為陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染，試劑(jì)汙染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不(bù)當或試劑(jì)配製不準確(què)引起(qǐ)的試劑檢測效(xiào)能(néng)下降，可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假陰(yīn)性結果。
PCR反應(yīng)的特(tè)異性：
②鹼基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
球孢子菌通用PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其中引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)正(zhèng)確(què)結(jié)合是關鍵。引物與(yǔ)模板的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈的延伸(shēn)是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配對原則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合成反應的(dí)忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應中模板與引(yǐn)物的結(jié)合(hé)(復性)可以在較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下進行，結合(hé)的特(tè)異(yì)性大(dà)大增加(jiā)，被(bèi)擴增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確度。再(zài)通過(guò)選擇(zé)特異(yì)性和保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶基因區，其特(tè)異性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的生(shēng)成量是(shì)以指數(shù)方式(shì)增(zēng)加的(dí)，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬個(gè)細胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個(gè)靶細胞；在病毒的(dí)檢測中，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單位(wèi))；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性地將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴增液(yè)和水浴鍋上進行變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般(bān)在(zài)2～4 小時完成擴(kuò)增反應。擴增產物一(yī)般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素(sù)，無放射性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純(chún)度要(yào)求(qiú)低(dī)
不(bù)需要分(fēn)離病毒或細(xì)菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床標本(běn)如血液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽液，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概論。
- 上一條(tiáo)：嗜(shì)人(rén)錐蠅(yíng)PCR檢測試劑盒
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