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PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
點(diǎn)狀(zhuàng)古柏(bǎi)綫(xiàn)蟲(chóng)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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點狀古(gǔ)柏綫蟲PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
Cooperia pectinataPCR |
YS-P014050 |
分類:PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn):-20℃避光保(bǎo)存,避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸:低(dī)溫(wēn),避光(guāng)。
有效(xiào)期:一年(nián)
貨期:現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效期(qī)一般為1年(nián),這(zhè)是(shì)指在適(shì)當的儲存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸擴增部分的試(shì)劑一般(bān)要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià),產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng):將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在剛好超(chāo)過正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的最高點。
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢測結果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng),有(yǒu)明顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於35;
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在一次實驗中同時滿足(zú),否(fǒu)則該次實(shí)驗視為(wéi)無效(xiào)。
2.可疑(yí):有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī),且38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑樣本;對(duì)於可疑(yí)樣本建議復(fù)核(hé)一(yī)次(cì),若(ruò)復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增(zēng)期,則判(pàn)定為(wéi)陽性,否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無指(zhǐ)數擴增期(qī),Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙染,試劑汙染,樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ);
2. 試(shì)劑運輸,保(bǎo)存(cún)不(bù)當或試(shì)劑(jì)配(pèi)製不準確引(yǐn)起的(dí)試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下降,可能會(huì)導致出(chū)現假陰(yīn)性(xìng)結果。
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與(yǔ)保(bǎo)守性。
點狀(zhuàng)古柏綫(xiàn)蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模板(bǎn)的(dí)正確結合是(shì)關鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合及(jí)引物鏈的(dí)延伸是遵循(xún)鹼基配對(duì)原則的。聚合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫(wēn)性,使反(fǎn)應中模板與引物的(dí)結合(hé)(復性)可(kě)以在較高的(dí)溫(wēn)度下進行(háng),結合(hé)的(dí)特異性(xìng)大(dà)大增加(jiā),被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因片段也就能保(bǎo)持很高(gāo)的正(zhèng)確(què)度。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特(tè)異性(xìng)和保守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區(qū),其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物(wù)的生(shēng)成量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方式增加的,能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測模板(bǎn)擴(kuò)增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出一個靶細胞;在病毒的檢(jiǎn)測中,PCR的靈(líng)敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成單位);在細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便,快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi),一(yī)次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後,即在DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴鍋上(shàng)進行變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應,一(yī)般在2~4 小時完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用電(diàn)泳分析,不一定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素,無放(fàng)射性(xìng)汙染,易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標本的(dí)純度(dù)要求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞,DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本如血(xiě)液,體腔液,洗嗽液(yè),毛發,細(xì)胞,活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
