產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
|
節狀古柏綫蟲PCR檢測試劑盒 |
Cooperia oncophoraPCR |
YS-P014049 |
分(fēn)類:PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲存(cún)條件:-20℃避光(guāng)保(bǎo)存,避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸(shū):低(dī)溫(wēn),避光。
有效(xiào)期:一年
貨(huò)期(qī):現(xiàn)貨PCR試劑盒的有(yǒu)效期一(yī)般(bān)為1年,這是指(zhǐ)在適當(dāng)的儲存溫度(dù)下。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分的(dí)試(shì)劑一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下(xià),產物(wù)檢測部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融(róng)。
u 閾值(Threshold)設定:將閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定在剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫的最(zuì)高點。
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽性,有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴增(zēng)期,Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在(zài)一次實驗中同時滿足,否則(zé)該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本為可疑樣本;對(duì)於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核一(yī)次(cì),若復核(hé)結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增期,則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng),否則判定為(wéi)陰性(xìng);
3. 陰(yīn)性(xìng):無指數(shù)擴增(zēng)期(qī),Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定為陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙染,試劑汙(wū)染(rǎn),樣品交叉汙染會出(chū)現假陽性結(jié)果(guǒ);
2. 試劑(jì)運輸,保存不(bù)當或(huò)試劑配製不準(zhǔn)確引起的試劑檢(jiǎn)測(cè)效能下(xià)降(jiàng),可(kě)能會(huì)導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性結果(guǒ)。
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因(yīn)的特異(yì)性(xìng)與保守(shǒu)性(xìng)。
節狀古(gǔ)柏綫蟲(chóng)PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其中(zhōng)引物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性,使反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在(zài)較高的溫度(dù)下進行(háng),結合的(dí)特異性大大(dà)增(zēng)加(jiā),被擴增的(dí)靶(bǎ)基因片段也就能保持很(hěn)高(gāo)的正確度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性和(hé)保守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區,其(qí)特異(yì)性程度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增(zēng)加的(dí),能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出一(yī)個靶細(xì)胞;在(zài)病毒的檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的靈敏度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成單(dān)位(wèi));在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶,一次性地將(jiāng)反(fǎn)應液加(jiā)好後(hòu),即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴鍋上進行(háng)變性-退火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應(yīng),一般在2~4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增反應。擴增產物一(yī)般用電泳分(fēn)析,不一定要(yào)用同位素(sù),無放射(shè)性汙染,易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純(chún)度要求低
不(bù)需要分(fēn)離(lí)病毒或細(xì)菌及培養細胞,DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模板。可直(zhí)接(jiē)用臨床(chuáng)標本(běn)如血(xiě)液(yè),體腔液(yè),洗(xǐ)嗽(sòu)液,毛發(fā),細(xì)胞,活(huó)PCR技(jì)術概論(lùn)。
