產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
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反(fǎn)芻獸考德裏(lǐ)氏體(tǐ)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
Cowdria ruminantiumPCR |
YS-P014062 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一(yī)年
貨期：現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期(qī)一般為1年，這是指(zhǐ)在適(shì)當的儲(chǔ)存溫度下(xià)。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑一般(bān)要貯存(cún)於-20℃下，產物檢測(cè)部(bù)分試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量避免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值(zhí)綫設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最高點。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性，有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在一次實驗(yàn)中(zhōng)同時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗視(shì)為無效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑：有明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核一(yī)次，若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增期，則判(pàn)定(dìng)為陽性，否則判定為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定為陰性樣本(běn)。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現假陽(yáng)性結果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存(cún)不當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不準確引(yǐn)起的試劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可能會導(dǎo)致出(chū)現假陰性結果。
PCR反應(yīng)的特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反應的忠(zhōng)實性；
④靶基因的(dí)特異(yì)性與(yǔ)保守(shǒu)性。
反芻獸(shòu)考德裏(lǐ)氏(shì)體PCR檢測試劑盒其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模板的正確結合(hé)是(shì)關鍵。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈的(dí)延伸是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配對原則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模(mó)板與引物的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下(xià)進行，結合的特異(yì)性大大增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基因(yīn)片段也就能保持很(hěn)高(gāo)的(dí)正確(què)度。再通過選擇特異(yì)性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的靶基因區，其(qí)特異性程度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成量是(shì)以指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶細胞；在病毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位)；在細菌學中zui小檢出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反應液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變(biàn)性-退火-延(yán)伸(shēn)反應，一般在2～4 小時(shí)完成擴增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不一定(dìng)要用同(tóng)位素，無放(fàng)射性(xìng)汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要(yào)分離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及培(péi)養細胞，DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模板。可(kě)直接(jiē)用臨床標本(běn)如血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛發，細胞(bāo)，活PCR技術概論(lùn)。
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