產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產品名稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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霍亂弧(hú)菌通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
Vibrio choleraePCR |
YS-P014908 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一年
貨期：現貨PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期一般為1年，這是指在(zài)適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下。核(hé)酸擴增部分的(dí)試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測(cè)部(bù)分試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復(fù)凍(dòng)融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品擴增(zēng)曲(qū)綫的最(zuì)高點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品的檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需在(zài)一次實驗中(zhōng)同(tóng)時滿足，否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣本；對於可(kě)疑(yí)樣本建議(yì)復(fù)核一次，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判定為(wéi)陽性，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果的解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境汙染，試劑汙(wū)染，樣品交叉汙染(rǎn)會出(chū)現假陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保存(cún)不(bù)當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確引起的試劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下降(jiàng)，可能會導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異性(xìng)與保守(shǒu)性(xìng)。
霍亂弧(hú)菌通用PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其(qí)中引物與(yǔ)模板的正(zhèng)確結合是(shì)關鍵。引(yǐn)物與模板(bǎn)的結(jié)合及引(yǐn)物鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原則(zé)的。聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模板(bǎn)與引物的結合(復(fù)性)可以(yǐ)在較高(gāo)的溫(wēn)度下進行，結合的(dí)特異性大(dà)大增(zēng)加，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因片(piàn)段(duàn)也就能保持(chí)很(hěn)高(gāo)的(dí)正確度(dù)。再(zài)通過選擇特異(yì)性(xìng)和保守(shǒu)性(xìng)高的靶基(jī)因區，其(qí)特(tè)異性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成量(liáng)是(shì)以指數(shù)方(fāng)式增加的(dí)，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單位)；在細菌(jūn)學中zui小檢出率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次(cì)性地將(jiāng)反應液(yè)加好後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行變性(xìng)-退火-延伸反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一般(bān)用電泳分(fēn)析，不一定要用同(tóng)位素(sù)，無放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純(chún)度要(yào)求(qiú)低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增模板。可(kě)直接用臨床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
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