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PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品名稱 | 英(yīng)文名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
|
鵪鶉奇(qí)異綫蟲PCR檢測(cè)試劑盒 |
Cyrnea coliniPCR |
YS-P014082 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一(yī)年
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期一(yī)般為1年(nián)，這是指在適當的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸(suān)擴增(zēng)部分(fēn)的(dí)試劑一般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下，產物(wù)檢測部分試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫(xiàn)設定在剛(gāng)好超過正(zhèng)常陰性質控品擴增曲(qū)綫的最(zuì)高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期(qī)，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在一次實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時滿足，否則該(gāi)次實驗視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為可(kě)疑樣本(běn)；對(duì)於可疑樣本建議復(fù)核一次，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，則判定為陽性，否則判(pàn)定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙染，試劑汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉汙(wū)染會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸，保(bǎo)存不當或試劑配(pèi)製不準確(què)引(yǐn)起的(dí)試劑檢測(cè)效能下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰性結果。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的(dí)忠實性；
④靶基因(yīn)的特(tè)異性與(yǔ)保守(shǒu)性。
鵪(ān)鶉(chún)奇異(yì)綫蟲PCR檢測(cè)試劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合是關鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的(dí)結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈的(dí)延伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配(pèi)對原則的。聚(jù)合酶(méi)合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高溫性，使反(fǎn)應中模(mó)板與引物(wù)的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可以在(zài)較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進行(háng)，結合的(dí)特異性大大增(zēng)加，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段(duàn)也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持很高(gāo)的(dí)正確(què)度。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和保守性高的靶(bǎ)基因區，其特異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量是以指數方式增加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始(shǐ)待測(cè)模板擴增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢(jiǎn)出一(yī)個靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中，PCR的靈(líng)敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌(jūn)學中zui小檢出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加好後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反應，一般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完(wán)成擴增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一般用電泳(yǒng)分析，不一(yī)定要(yào)用同位(wèi)素，無(wú)放射性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的純度(dù)要(yào)求低
不(bù)需要(yào)分(fēn)離(lí)病毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均可(kě)作為擴增模(mó)板。可直(zhí)接用(yòng)臨床標本如血液，體腔液，洗嗽液，毛發，細胞，活(huó)PCR技術概(gài)論。
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