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產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測試劑盒
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱 | 英文(wén)名稱 | 貨(huò)號 |
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革蜱PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
Dermacenter spp.PCR |
YS-P014090 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試劑盒
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光保存，避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一般(bān)為1年，這是指在(zài)適當(dāng)的儲存(cún)溫度下。核酸擴增(zēng)部分的試(shì)劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測部(bù)分(fēn)試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
【結果分析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫設定(dìng)在(zài)剛好超過(guò)正(zhèng)常陰性質控品擴增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測結果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴增期，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在(zài)一(yī)次實驗中同時滿(mǎn)足，否則(zé)該次(cì)實(shí)驗視(shì)為無效。
【結果判斷】
2.可疑：有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本；對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核一次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性，否(fǒu)則判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰性樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉汙(wū)染會出(chū)現(xiàn)假陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起的(dí)試劑(jì)檢測(cè)效能下降，可(kě)能會(huì)導致出現假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反應的忠實性；
④靶基因的(dí)特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
革蜱PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關鍵。引(yǐn)物與模(mó)板的(dí)結(jié)合(hé)及引物鏈的延伸是(shì)遵循鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫性(xìng)，使反(fǎn)應中(zhōng)模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結合(復(fù)性)可以在(zài)較高(gāo)的溫度下進(jìn)行，結(jié)合(hé)的特異性大大增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基因片(piàn)段也(yě)就能保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再通過選(xuǎn)擇特(tè)異性和保守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基因(yīn)區，其特異(yì)性程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的生成量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數方式增加(jiā)的，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒的檢測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單(dān)位)；在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一(yī)定要用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無放射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度要求(qiú)低
不需(xū)要分(fēn)離(lí)病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及(jí)培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增模板。可直(zhí)接用臨床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論。
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