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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
貝爾格萊德(dé)病毒型PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
| 產(chǎn)品名稱 | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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貝爾格萊(lái)德病(bìng)毒型(xíng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
DobravaBelgrade Virus PCR |
YS-P014102 |
分(fēn)類:PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn):-20℃避(bì)光保(bǎo)存,避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
運輸:低(dī)溫,避光。
有效期:一年
貨期(qī):現貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效期一般(bān)為(wéi)1年(nián),這(zhè)是指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度下。核(hé)酸擴增(zēng)部分(fēn)的(dí)試劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià),產物檢測(cè)部分試劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融。
u 閾值(Threshold)設(shè)定:將閾值綫設定(dìng)在剛好超過正常陰性(xìng)質控品擴增曲綫的最高點(diǎn)。
2. 陽(yáng)性質控品的(dí)檢測(cè)結果(guǒ)應為陽性(xìng),有明(míng)顯的指數(shù)擴增期(qī),Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於35;
3. 以上要(yào)求需(xū)在一次實(shí)驗中同時滿足,否則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
2.可疑(yí):有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期,且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本為(wéi)可疑樣本(běn);對於可(kě)疑(yí)樣本建議復(fù)核(hé)一(yī)次,若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī),則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng),否則判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性(xìng):無(wú)指數(shù)擴增(zēng)期,Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙(wū)染(rǎn),試(shì)劑汙(wū)染,樣品交叉(chā)汙染會出(chū)現假(jiǎ)陽性(xìng)結果;
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū),保(bǎo)存不當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製(zhì)不準確引起的試(shì)劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降,可(kě)能會導致(zhì)出現假陰性(xìng)結果。
②鹼基配對(duì)原(yuán)則;
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng);
④靶基因(yīn)的(dí)特異性與(yǔ)保守性。
貝爾(ěr)格萊德病毒型(xíng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其(qí)中(zhōng)引物與(yǔ)模板(bǎn)的正確結(jié)合是關鍵。引物與模板的(dí)結(jié)合及引物鏈的(dí)延伸是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則(zé)的(dí)。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫性,使(shǐ)反應(yīng)中模板與(yǔ)引物(wù)的結合(復(fù)性)可以在(zài)較高的溫度下進行,結(jié)合的特(tè)異性大大增加(jiā),被擴增(zēng)的靶基(jī)因片(piàn)段(duàn)也(yě)就能(néng)保持很高的(dí)正確(què)度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的靶(bǎ)基(jī)因區,其(qí)特(tè)異性程度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數方式增(zēng)加的,能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待(dài)測模板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細胞中檢出(chū)一(yī)個靶細(xì)胞(bāo);在(zài)病毒的(dí)檢測中(zhōng),PCR的(dí)靈(líng)敏度可(kě)達3個RFU(空斑形成單(dān)位);在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便,快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一次性地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加好後(hòu),即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行(háng)變性-退火(huǒ)-延伸反應,一般在(zài)2~4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增反應。擴增產(chǎn)物(wù)一般用電(diàn)泳分(fēn)析,不一定要用同(tóng)位素(sù),無放(fàng)射性(xìng)汙染,易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度(dù)要(yào)求低
不(bù)需(xū)要分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細胞,DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如(rú)血液(yè),體(tǐ)腔(qiāng)液,洗嗽液(yè),毛發,細(xì)胞,活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
