產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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長(cháng)鼻(bí)分咽綫(xiàn)蟲PCR檢測試劑盒(hé) |
Dispharynx nasutaPCR |
YS-P014101 |
分類：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避免(miǎn)反復凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避(bì)光。
有效期(qī)：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有效期一(yī)般(bān)為1年(nián)，這是指(zhǐ)在適當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫度下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的試劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產物檢測部(bù)分試劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反復凍融(róng)。
【結果分(fēn)析(xī)條件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫設定在剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰性質控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽性，有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需(xū)在一(yī)次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足，否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗視(shì)為無效。
【結果判斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可疑樣本；對於(yú)可疑(yí)樣本建議(yì)復(fù)核(hé)一次，若復核(hé)結果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則判定為(wéi)陽性，否則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；
2. 試劑運輸(shū)，保存不當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢測效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能會導致(zhì)出現假陰性結果。
PCR反應的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應的忠實性；
④靶基因(yīn)的特(tè)異性與保守(shǒu)性。
長(cháng)鼻分咽(yān)綫蟲PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物與模(mó)板的正確結(jié)合是(shì)關鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)結合及引(yǐn)物鏈的延伸是(shì)遵循鹼基配對(duì)原(yuán)則的。聚合酶(méi)合成反應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引物(wù)的結合(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫度下(xià)進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特異(yì)性大(dà)大增加，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能(néng)保持(chí)很(hěn)高的正確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特異(yì)性和保(bǎo)守(shǒu)性高的靶基因區，其特異性(xìng)程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方式增加(jiā)的，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中檢出(chū)一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒的檢測中，PCR的靈(líng)敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位(wèi))；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一次(cì)性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增液和水浴鍋(guō)上進行變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不一定(dìng)要用同(tóng)位素，無(wú)放射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度(dù)要求(qiú)低
不需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒或細菌及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及總(zǒng)RNA均可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模板。可(kě)直接用臨床標本如血液，體腔液(yè)，洗嗽液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術概論(lùn)。
