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產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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馬流感病(bìng)毒亞型(xíng)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Equine Influenza Virus(EIV)H3N8RTPCR |
YS-P014167 |
分類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光。
有效期：一年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在(zài)適當(dāng)的儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸擴增(zēng)部分的(dí)試(shì)劑一(yī)般要貯存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍融(róng)。
【結果分析條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定在剛好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最(zuì)高點。
【質控標準】
2. 陽性質控(kòng)品的檢測結(jié)果應為(wéi)陽性，有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿足(zú)，否則該(gāi)次實驗視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣本；對於可疑樣本建(jiàn)議(yì)復核一次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增(zēng)期(qī)，則(zé)判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng)，否則判定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實驗室(shì)環境汙染，試劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染會出現假陽(yáng)性結果；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製(zhì)不準確引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測效能下(xià)降，可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致出(chū)現假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的忠實性；
④靶基因(yīn)的(dí)特異性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
馬(mǎ)流感病(bìng)毒亞型PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其中(zhōng)引(yǐn)物與模板的正確結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物與模板的(dí)結(jié)合及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸是(shì)遵循(xún)鹼基配對原則的(dí)。聚合酶合(hé)成反應的(dí)忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫性，使反應中模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高的(dí)溫度下進(jìn)行(háng)，結合(hé)的(dí)特異性大大增加，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的正確(què)度(dù)。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇特異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高的(dí)靶基因區，其特異(yì)性程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wù)的生成量(liáng)是(shì)以指數方(fāng)式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測(cè)模(mó)板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢出一個靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈敏度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次性地將(jiāng)反應(yīng)液加(jiā)好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴鍋(guō)上進行變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般在2～4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般(bān)用(yòng)電泳分析，不一定要用(yòng)同(tóng)位素，無放射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度要求低
不需(xū)要分離病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作為擴增模(mó)板。可直接用臨床標本(běn)如血(xiě)液，體腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術概論(lùn)。
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