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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
紅(hóng)薯(shǔ)內源基(jī)因(yīn)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 規(guī)格(gé) | 貨號 |
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紅薯(shǔ)內(nèi)源基因PCR檢測(cè)試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015046 |
儲(chǔ)存條件(jiàn):-20℃避(bì)光保(bǎo)存,避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸:低溫,避光(guāng)。
有效期(qī):一(yī)年
貨(huò)期:現貨(huò)PCR試劑盒的有效(xiào)期一(yī)般為1年,這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存溫度下。核酸(suān)擴增(zēng)部分的試(shì)劑(jì)一般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下,產物(wù)檢測(cè)部分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。

u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng):將閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在剛好(hǎo)超過(guò)正常陰性(xìng)質控品擴(kuò)增曲(qū)綫的(dí)最高點(diǎn)。
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢(jiǎn)測結果應為陽性,有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴增期(qī),Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35;
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在一次實驗(yàn)中同時(shí)滿足(zú),否則(zé)該次(cì)實(shí)驗視(shì)為無(wú)效。
2.可疑(yí):有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴增期(qī),且38≤Ct<40,此時樣(yàng)本為可疑樣(yàng)本(běn);對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復核一(yī)次,若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴(kuò)增期,則(zé)判定(dìng)為陽性,否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3. 陰(yīn)性(xìng):無(wú)指數擴增(zēng)期(qī),Ct=40或無Ct值均判定為陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙染,試劑汙(wū)染,樣(yàng)品(pǐn)交叉汙(wū)染會出現假陽性結果;
2. 試劑運輸,保存不當或(huò)試劑配(pèi)製不準確引起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降,可能會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結果。

②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則(zé);
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實性;
④靶(bǎ)基(jī)因的特(tè)異性(xìng)與保守(shǒu)性。
紅(hóng)薯內源(yuán)基因(yīn)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的(dí)正確(què)結合是(shì)關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的結合(hé)及引物鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵循(xún)鹼基(jī)配對原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合酶合成(chéng)反應的(dí)忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫(wēn)性,使反應中(zhōng)模板與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(hé)(復性)可(kě)以在較(jiào)高的溫度下(xià)進(jìn)行(háng),結(jié)合(hé)的(dí)特異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增加,被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因(yīn)片段也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高(gāo)的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性和(hé)保守性(xìng)高的靶基因區(qū),其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生成量(liáng)是以指數(shù)方(fāng)式增加(jiā)的,能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個細胞(bāo)中檢出一(yī)個靶細胞(bāo);在(zài)病毒(dú)的檢測中(zhōng),PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空斑形成(chéng)單位(wèi));在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小檢出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡便,快速
PCR反應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi),一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加(jiā)好後(hòu),即在(zài)DNA擴增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng),一般在(zài)2~4 小時(shí)完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產物一(yī)般(bān)用電泳(yǒng)分析,不一定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位素(sù),無放射性(xìng)汙(wū)染,易推廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純(chún)度要求低(dī)
不需(xū)要分離病毒或細(xì)菌及培養細(xì)胞(bāo),DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模板。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液,體(tǐ)腔(qiāng)液,洗(xǐ)嗽液,毛發,細(xì)胞,活PCR技術(shù)概論(lùn)。
