產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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馬鼻炎(yán)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒 |
Equine Rhinitis VirusPCR |
YS-P014169 |
分類：PCR檢測試劑(jì)盒
儲存條件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍融。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有效期(qī)：一年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年，這(zhè)是指在適(shì)當的儲存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部分的試劑一般(bān)要貯存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部分試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避免反復凍(dòng)融。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超過正(zhèng)常陰(yīn)性質控品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於(yú)等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿足(zú)，否則(zé)該次實(shí)驗視(shì)為(wéi)無效。
【結(jié)果判斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣本(běn)；對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核一(yī)次(cì)，若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，則判(pàn)定(dìng)為陽性，否則判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結果的解釋】
1. 實驗(yàn)室環境(jìng)汙染，試(shì)劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉汙染會(huì)出(chū)現假陽(yáng)性結果；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存不當或試劑配製(zhì)不(bù)準確引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑檢測效能(néng)下降，可能(néng)會導致出現假(jiǎ)陰性結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基因(yīn)的特(tè)異性(xìng)與保守性(xìng)。
馬(mǎ)鼻炎病(bìng)毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其中引物與(yǔ)模板的正確(què)結合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模板的結合及引(yǐn)物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與引(yǐn)物的(dí)結合(復性)可以在較高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特異(yì)性大(dà)大(dà)增加，被擴增的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高的正確(què)度。再通過選擇特異性和(hé)保守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因區，其(qí)特(tè)異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量(liáng)是以指(zhǐ)數方式增(zēng)加的(dí)，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個靶細(xì)胞；在病毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏度可(kě)達3個RFU(空斑形成(chéng)單位(wèi))；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反應液加好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳分析(xī)，不一定要用同(tóng)位素，無放射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標本的純度(dù)要求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培養細胞，DNA 粗製品及總RNA均可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用臨床標本如(rú)血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
