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PCR檢測試劑(jì)盒
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨(huò)號 |
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馬鼻肺炎(yán)病(bìng)毒PCR檢測試劑盒 |
Equine Rhinopneumonitis Virus（ERV）PCR |
YS-P014170 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸：低溫，避光(guāng)。
有效期：一年
貨(huò)期：現貨PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期一般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的(dí)試(shì)劑(jì)一般要貯存於-20℃下，產物(wù)檢測(cè)部分試劑則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正常陰性質控(kòng)品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為陽(yáng)性，有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需在(zài)一(yī)次實(shí)驗中(zhōng)同時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則該次(cì)實驗視為(wéi)無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣(yàng)本(běn)；對於可(kě)疑樣本建議復核一次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增期(qī)，則判定為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或無Ct值均判定為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣品交叉汙染會(huì)出(chū)現假陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保(bǎo)存不當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製(zhì)不(bù)準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑檢測(cè)效能下(xià)降，可能(néng)會導致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應的特異性：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
馬鼻肺炎(yán)病毒PCR檢測試(shì)劑盒其中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確結合(hé)是關(guān)鍵。引物與(yǔ)模板的(dí)結合及引物鏈的延伸是遵循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反應中模板與(yǔ)引物的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在較高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進行，結合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性大(dà)大增加，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基(jī)因片段(duàn)也就能保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通過選擇特異(yì)性(xìng)和(hé)保守性高的靶基(jī)因(yīn)區，其(qí)特(tè)異性程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成量是(shì)以指(zhǐ)數方式(shì)增加(jiā)的(dí)，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬個細胞中(zhōng)檢出一(yī)個靶細胞；在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單位)；在細菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性地將(jiāng)反應液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和水浴鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應，一般(bān)在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素，無(wú)放射性汙染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度(dù)要求(qiú)低
不需要(yào)分離(lí)病毒或(huò)細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板。可直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標本如血液，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技術(shù)概論。
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