產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性
| 產品名稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨(huò)號 |
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紅(hóng)斑(bān)丹(dān)毒絲(sī)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
Erysipelothrix rhusiopathiaePCR |
YS-P014174 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免反復凍融。
運輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期一般為1年(nián)，這是指(zhǐ)在適(shì)當的儲存溫(wēn)度(dù)下。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部分(fēn)試劑(jì)則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值綫(xiàn)設定(dìng)在剛好(hǎo)超過正常陰(yīn)性質(zhì)控品擴增曲(qū)綫的最高(gāo)點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陽性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應小於等於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一(yī)次(cì)實(shí)驗中同時滿(mǎn)足(zú)，否則該次(cì)實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為可疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可疑樣本建議復核(hé)一次，若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，則(zé)判定為陽性，否則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙染，試劑汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存(cún)不當或(huò)試劑配製不準確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下降，可能(néng)會導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特(tè)異(yì)性與保守性(xìng)。
紅斑丹(dān)毒絲菌(jūn)PCR檢測試劑盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的正(zhèng)確(què)結合是(shì)關鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的結合及引物鏈的(dí)延伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配對(duì)原則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板與引(yǐn)物(wù)的結合(hé)(復性)可(kě)以在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度下進行，結(jié)合的特(tè)異性大大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段也就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的(dí)正確度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保守(shǒu)性高的(dí)靶基(jī)因區，其(qí)特異(yì)性程(chéng)度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的(dí)生(shēng)成(chéng)量是(shì)以指數(shù)方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測模板擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中(zhōng)檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞；在病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑形成單位(wèi))；在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一次性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反應，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物一般用(yòng)電(diàn)泳分析(xī)，不一定要用(yòng)同位(wèi)素(sù)，無(wú)放射性汙(wū)染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標本(běn)的(dí)純度(dù)要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要分離病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養細胞，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴增模(mó)板。可(kě)直接(jiē)用臨(lín)床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體腔液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
