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PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
| 產品名(míng)稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
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牛(niú)海綿狀腦(nǎo)病毒(dú)PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015156 |
儲存條件:-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存,避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸:低溫(wēn),避光。
有效(xiào)期:一(yī)年(nián)
貨期:現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般為1年(nián),這是指(zhǐ)在(zài)適當的儲存溫度(dù)下(xià)。核酸擴增部分的試(shì)劑一般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià),產物檢測部分試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。

u 閾值(Threshold)設(shè)定:將閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定在(zài)剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質控品擴增曲(qū)綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng),有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增期,Ct值應小(xiǎo)於等於35;
3. 以上(shàng)要求需(xū)在一次實(shí)驗中同時滿(mǎn)足(zú),否則該(gāi)次實驗視為無(wú)效。
2.可疑(yí):有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為(wéi)可疑樣(yàng)本(běn);對於可疑樣本建議(yì)復核一次,若復核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī),則判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性(xìng),否則(zé)判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性(xìng):無(wú)指數擴增期(qī),Ct=40或無Ct值均判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙(wū)染,試(shì)劑汙染(rǎn),樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出(chū)現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ);
2. 試劑(jì)運(yùn)輸,保(bǎo)存不當或試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引起的試劑(jì)檢測效能下降(jiàng),可能會(huì)導致(zhì)出現假陰性結果(guǒ)。

②鹼基(jī)配對(duì)原則;
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng);
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守性。
牛海(hǎi)綿狀腦病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與(yǔ)模板的正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結合(hé)及引物鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循鹼基配對原(yuán)則(zé)的。聚合酶(méi)合成反應的忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性(xìng),使反應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下(xià)進行(háng),結合(hé)的(dí)特異性(xìng)大大增加,被(bèi)擴增的靶基因片段也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特異性和保守性(xìng)高的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區,其(qí)特異(yì)性程(chéng)度就更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增加的(dí),能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞中檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細胞;在病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中,PCR的靈敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單(dān)位);在(zài)細(xì)菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率為3個細菌。
(3) 簡便(biàn),快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi),一(yī)次性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後(hòu),即在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火-延伸反應(yīng),一般(bān)在2~4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增(zēng)反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳(yǒng)分析,不一定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位素,無(wú)放射(shè)性(xìng)汙染,易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要(yào)求(qiú)低
不需要(yào)分離病(bìng)毒或細菌及(jí)培養細胞(bāo),DNA 粗製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模(mó)板。可直接用臨(lín)床(chuáng)標本如(rú)血液(yè),體腔(qiāng)液(yè),洗嗽液(yè),毛(máo)發(fā),細胞(bāo),活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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