產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
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歐(ōu)洲(zhōu)棕(zōng)色野(yě)兔(tù)綜(zōng)合症病(bìng)毒PCR檢測(cè)試劑(jì)盒 |
European Brown Hare Syndrome Virus(EBHSV)RTPCR |
YS-P014180 |
分類：PCR檢測試劑盒(hé)
儲存條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避免(miǎn)反復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有效期(qī)一(yī)般(bān)為1年，這(zhè)是指在適(shì)當的儲(chǔ)存溫(wēn)度下(xià)。核酸擴增部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部分(fēn)試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結果分(fēn)析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定在(zài)剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控品擴增(zēng)曲(qū)綫的最高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測結果應為(wéi)陽性，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需在一次(cì)實驗(yàn)中同時滿足，否則(zé)該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無效。
【結果判斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可疑樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可疑樣本(běn)建議復(fù)核一(yī)次，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，則判定為陽(yáng)性(xìng)，否則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰性：無指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出現假陽(yáng)性結果；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存(cún)不(bù)當或(huò)試劑(jì)配(pèi)製不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢測效能下(xià)降，可(kě)能(néng)會導致出現假(jiǎ)陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反應的特(tè)異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異(yì)性與保(bǎo)守(shǒu)性。
歐洲棕色野兔(tù)綜合症病毒PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其中引物與模板的正(zhèng)確結合是(shì)關鍵。引物(wù)與(yǔ)模板的結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延伸是(shì)遵循(xún)鹼基配(pèi)對原則的。聚(jù)合酶合成(chéng)反應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與(yǔ)引物的結合(復(fù)性)可以在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進行，結合的(dí)特異(yì)性大(dà)大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因片段(duàn)也就能保持很(hěn)高的(dí)正確度(dù)。再(zài)通過選擇(zé)特異(yì)性和保守(shǒu)性(xìng)高的靶基因區，其特異性程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生成量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數方式增加的，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個靶細(xì)胞；在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地將(jiāng)反應(yīng)液加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴鍋上進行變性-退火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素，無放射(shè)性汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純(chún)度要求(qiú)低
不(bù)需(xū)要(yào)分離病毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
