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產品中心
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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闊盤吸蟲通(tōng)用(yòng)PCR檢測試劑盒(hé) |
Eurytrema spp.PCR |
YS-P014184 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑盒
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸：低溫，避(bì)光。
有效期(qī)：一年
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期一般為1年(nián)，這是指在適當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復凍融。
【結(jié)果分析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定在剛好超過正常陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增曲(qū)綫的(dí)最高點。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增期，Ct值應小於等於35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在一次實驗中(zhōng)同(tóng)時滿足(zú)，否則(zé)該次實驗視為無(wú)效。
【結(jié)果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有明(míng)顯的(dí)指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑樣本(běn)；對於可(kě)疑樣本建議復核一(yī)次(cì)，若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增(zēng)期，則判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會出現假陽性結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保存不(bù)當(dāng)或試劑配製(zhì)不(bù)準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑檢測效(xiào)能(néng)下降，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致出(chū)現假陰性結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠實性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異(yì)性與保守性(xìng)。
闊盤吸(xī)蟲通用(yòng)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的結合及引物(wù)鏈的(dí)延伸(shēn)是遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使反(fǎn)應中(zhōng)模板(bǎn)與引物的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可以(yǐ)在較(jiào)高的(dí)溫度(dù)下(xià)進行(háng)，結合的特(tè)異性(xìng)大大增加，被擴(kuò)增(zēng)的靶基(jī)因片段也就能保持(chí)很(hěn)高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇特異(yì)性和保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區(qū)，其特(tè)異性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成量是以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始(shǐ)待測模(mó)板(bǎn)擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出(chū)一個靶細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒的檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位)；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性地將反(fǎn)應液加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴鍋上進(jìn)行(háng)變性-退火-延伸(shēn)反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反(fǎn)應。擴增產物一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一(yī)定(dìng)要用(yòng)同位素(sù)，無(wú)放射性汙(wū)染，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純(chún)度要求低
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為擴(kuò)增模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床(chuáng)標本如(rú)血液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
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