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PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱 | 英文(wén)名稱 | 貨(huò)號 |
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野牛(niú)奧斯特(tè)綫蟲(chóng)PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
Ostertagia bisonisPCR |
YS-P014537 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
儲存條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效期：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒的有效期一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在適當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸擴增部分(fēn)的試劑(jì)一般要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫設定在剛好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質控品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一次(cì)實驗中(zhōng)同時滿足(zú)，否則該次(cì)實(shí)驗視為無效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可疑樣本(běn)；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復核(hé)一次，若復核結果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存不當或試劑(jì)配製不準(zhǔn)確(què)引起的(dí)試劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下降，可能會(huì)導(dǎo)致出(chū)現假陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性(xìng)：
②鹼基配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基因的特(tè)異性與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
野牛奧斯特(tè)綫蟲(chóng)PCR檢測試劑(jì)盒其中引物與(yǔ)模板的(dí)正(zhèng)確結合是關鍵。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵循(xún)鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶合(hé)成反應的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較高的溫度下進行，結(jié)合(hé)的特異(yì)性大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片段(duàn)也(yě)就能保持很高的正確度(dù)。再(zài)通過選(xuǎn)擇特異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高的靶基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異性程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量(liáng)是以(yǐ)指數方式(shì)增加(jiā)的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢出一(yī)個靶細(xì)胞(bāo)；在病毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位)；在(zài)細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶，一次(cì)性地將反應液加(jiā)好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變(biàn)性-退火-延伸反應，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般用(yòng)電泳分析(xī)，不一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位素，無放(fàng)射性(xìng)汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度要求低(dī)
不需要分離病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可(kě)直接用臨(lín)床標本如(rú)血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論。
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