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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)

大片(piàn)吸(xī)蟲通用PCR檢測試劑盒(hé)

文字(zì):[大(dà)][中][小(xiǎo)] 2024-3-14    瀏覽次數:676    
商品屬性
產品名(míng)稱 英(yīng)文名(míng)稱(chēng) 貨號(hào)
大片吸蟲通用PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
Fasciola spp.PCR
YS-P014189
規(guī)格:50T
分類:PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn):-20℃避(bì)光保存,避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運輸:低溫,避光。
有效期:一年

貨期:現貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一般(bān)為1年(nián),這是指在(zài)適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核酸擴增(zēng)部(bù)分的試(shì)劑一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下,產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復凍(dòng)融。

【結果分(fēn)析條件(jiàn)設定(dìng)】
u 基(jī)綫(Baseline)設定:應選(xuǎn)擇(zé)該次實(shí)驗指數(shù)擴(kuò)增前所(suǒ)有樣(yàng)本熒(yíng)光信(xìn)號比(bǐ)較穩(wěn)定(dìng)的(dí)一段區(qū)域(yù)(所有(yǒu)樣本熒光信(xìn)號無較(jiào)大波動),起(qǐ)始點(Start)應避開熒光(guāng)采集(jí)起始(shǐ)階(jiē)段的信(xìn)號(hào)波動(dòng),終止點(diǎn)(End)應比最早(zǎo)出現指數(shù)擴(kuò)增(zēng)的樣(yàng)本Ct值減(jiǎn)少(shǎo)1~3個循(xún)環(huán),建議基綫(xiàn)設為(wéi)6~15。
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將閾值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過正(zhèng)常陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
1.   陰性質控品的檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為陰性,無(wú)指數(shù)擴增期,Ct=40或(huò)無Ct;
2.   陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢測結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性,有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期(qī),Ct值應(yīng)小於(yú)等於(yú)35;
3.   以(yǐ)上(shàng)要求需在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足,否則該次(cì)實驗視(shì)為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
1.   陽性:有明顯的指數擴增(zēng)期,且Ct<38;
2.可(kě)疑:有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期,且38≤Ct<40,此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣本;對(duì)於(yú)可疑(yí)樣本(běn)建議復(fù)核(hé)一次,若復核結果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),則判定為陽(yáng)性,否則判定(dìng)為(wéi)陰性;
3.   陰性(xìng):無指數(shù)擴增(zēng)期(qī),Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定為陰性樣本。
【對檢驗(yàn)結果的(dí)解釋(shì)】
1.   實驗室(shì)環境汙染(rǎn),試(shì)劑汙(wū)染,樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會(huì)出現假陽性結果;

2.   試劑(jì)運(yùn)輸(shū),保存不當或(huò)試劑配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的試(shì)劑檢測效(xiào)能(néng)下降(jiàng),可能會導致(zhì)出(chū)現假陰(yīn)性結果(guǒ)。

PCR反應的(dí)特(tè)異(yì)性:
   ①引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)DNA特異(yì)正(zhèng)確的結合;
   ②鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé);
   ③Taq DNA聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性(xìng);
   ④靶基因的特異性與(yǔ)保守(shǒu)性。
大(dà)片(piàn)吸蟲(chóng)通(tōng)用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其(qí)中引物與模板的(dí)正確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的結合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對原則的。聚(jù)合酶合成反應(yīng)的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫性,使反應中模板(bǎn)與引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可以(yǐ)在較高的溫(wēn)度下進(jìn)行(háng),結(jié)合(hé)的特異性大大增加,被擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基因片段也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高的靶(bǎ)基因區,其特(tè)異性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中檢(jiǎn)出一個靶細胞;在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中(zhōng),PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單位(wèi));在細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便,快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶,一(yī)次性(xìng)地將(jiāng)反應液加(jiā)好後,即(jí)在DNA擴增液和(hé)水浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變性-退(tuì)火-延伸反應(yīng),一(yī)般(bān)在2~4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析(xī),不一(yī)定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素,無放(fàng)射(shè)性汙染,易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要分離病毒或(huò)細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可作為擴增模(mó)板。可(kě)直(zhí)接用臨床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液(yè),體(tǐ)腔(qiāng)液(yè),洗嗽(sòu)液(yè),毛發(fā),細胞(bāo),活PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
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