產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名稱 | 貨(huò)號 |
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博(bó)茲(zī)曼熒光(guāng)杆菌(jūn)PCR檢測試劑(jì)盒 |
Fluoribacter bozemanaePCR |
YS-P014199 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
儲存條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避光。
有效期：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效期(qī)一般(bān)為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部分的(dí)試劑(jì)一般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部分試(shì)劑(jì)則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復(fù)凍融。
【結果分析條件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在(zài)一次實驗(yàn)中同時滿(mǎn)足，否則(zé)該次實驗視(shì)為無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為可疑(yí)樣本(běn)；對於(yú)可疑樣本建(jiàn)議復核一次，若復核結果Ct<40且有指數擴增期(qī)，則判定(dìng)為陽性，否則判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉汙染會出(chū)現假陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或試(shì)劑配製(zhì)不準確引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下降，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出現假陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特異性：
②鹼基配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶基因的特(tè)異性與保(bǎo)守性。
博茲曼熒光杆菌(jūn)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引物與模板的(dí)正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是關鍵。引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸(shēn)是(shì)遵循鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反(fǎn)應中(zhōng)模板與(yǔ)引物的結合(復性)可以在較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的特異性大(dà)大增加，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確度。再通過選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守性高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區，其(qí)特(tè)異(yì)性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的生成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指數方式增加的，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位)；在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次(cì)性地將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變(biàn)性-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一(yī)般在2～4 小時完成擴增反應。擴(kuò)增產物一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分析，不一(yī)定(dìng)要用(yòng)同位(wèi)素，無放射性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度(dù)要(yào)求低
不需要(yào)分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板。可(kě)直接用臨(lín)床標(biāo)本如血(xiě)液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論。
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