產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 規(guī)格 | 貨(huò)號(hào) |
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鉤狀螺旋體(tǐ)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015039 |
儲存(cún)條件：-20℃避光保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避光。
有效期：一年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的有效期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在適當的儲(chǔ)存溫度下(xià)。核(hé)酸擴增部分(fēn)的試(shì)劑一般要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物檢測部分試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免反復凍融。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設定在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品擴增曲(qū)綫的最高點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控品的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性，有明顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一次(cì)實驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則(zé)該次(cì)實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本；對於可疑樣本建議復核一次(cì)，若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判定為(wéi)陽性(xìng)，否則(zé)判定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為陰性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出現(xiàn)假陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或(huò)試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準確引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降，可能(néng)會導致(zhì)出現假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反應的特異性：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的(dí)忠實(shí)性(xìng)；
④靶基因(yīn)的特(tè)異(yì)性與保守(shǒu)性。
鉤狀螺旋(xuán)體PCR檢測(cè)試劑盒(hé) 其中引物與模板的正(zhèng)確(què)結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的(dí)結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈的(dí)延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的結(jié)合(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫度(dù)下進行(háng)，結合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大增(zēng)加，被擴(kuò)增的(dí)靶基因(yīn)片段也(yě)就能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的(dí)正確度。再(zài)通過選(xuǎn)擇特異(yì)性和保守(shǒu)性高的靶(bǎ)基因區，其特(tè)異(yì)性程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指數方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模板擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中檢出一個靶細胞；在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑形(xíng)成單位)；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反應液(yè)加好後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行變性-退(tuì)火-延(yán)伸反應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物一(yī)般用電泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性汙染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對標本的純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不需(xū)要分(fēn)離病毒(dú)或細菌及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
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