產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
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土拉(lā)熱(rè)弗(fú)朗(lǎng)西斯(sī)菌(jūn)PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
Francisella tularensisPCR |
YS-P014212 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避免反復凍融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的有效(xiào)期一般為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適當的(dí)儲(chǔ)存溫度下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分的試劑(jì)一(yī)般要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物檢測部分試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫設定在剛好超過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控品擴增曲綫的最高點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應為(wéi)陽性，有明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等於35；
3. 以上要求(qiú)需在一次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可疑樣本；對(duì)於可疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次(cì)，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期(qī)，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果的解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環境汙染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會出現(xiàn)假陽性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存不當或(huò)試(shì)劑(jì)配製不(bù)準確引起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測效能下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導致出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反應的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的特異性與保守(shǒu)性(xìng)。
土拉(lā)熱弗朗(lǎng)西斯(sī)菌PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的正確結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結合及引物鏈(liàn)的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼基配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性，使反(fǎn)應中模(mó)板與引物(wù)的結合(復(fù)性)可以(yǐ)在較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行，結(jié)合的(dí)特(tè)異(yì)性大大增加，被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很高(gāo)的正(zhèng)確度。再(zài)通過選(xuǎn)擇特異性和保守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基(jī)因(yīn)區，其特(tè)異(yì)性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的生成量(liáng)是以指(zhǐ)數方式增加的(dí)，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始待測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細胞；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性(xìng)地將(jiāng)反應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴(yù)鍋上(shàng)進行(háng)變性-退(tuì)火-延(yán)伸反應，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增產(chǎn)物一(yī)般(bān)用電泳分(fēn)析，不一定要用(yòng)同位素，無(wú)放射性汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純度要(yào)求低(dī)
不(bù)需要(yào)分離(lí)病毒(dú)或細(xì)菌及培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可直接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液，毛發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概(gài)論。
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