產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
|
禾(hé)穀鐮刀菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé) |
Fusarium graminearumPCR |
YS-P014214 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避免反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸：低溫，避光。
有效期(qī)：一年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的有效(xiào)期一般(bān)為1年，這(zhè)是指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存溫度(dù)下。核酸擴增部分(fēn)的試(shì)劑一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測(cè)部分試劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性質控品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢測(cè)結果應(yīng)為陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct值應(yīng)小於等於35；
3. 以上要求需在一次(cì)實驗中(zhōng)同時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實驗視(shì)為無效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可疑樣(yàng)本；對於可(kě)疑(yí)樣本(běn)建議復核一(yī)次，若復核結果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰性(xìng)樣本。
【對檢驗結果的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙染，試劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出現假陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試(shì)劑配製不準(zhǔn)確引起的試劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降，可能會(huì)導致出現假陰性結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特(tè)異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
禾(hé)穀(gǔ)鐮(lián)刀(dāo)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的正(zhèng)確結合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引物(wù)與模板的結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶(méi)合成反應的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫性，使(shǐ)反應(yīng)中模板與(yǔ)引物的(dí)結合(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的(dí)溫度下進(jìn)行，結合的特(tè)異性大大增加(jiā)，被擴增(zēng)的(dí)靶基(jī)因片段(duàn)也就能保持(chí)很高的正確度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異性和保(bǎo)守(shǒu)性高的(dí)靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其(qí)特異(yì)性程(chéng)度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生成量是以(yǐ)指數(shù)方式增加(jiā)的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在病(bìng)毒的(dí)檢測中，PCR的靈敏度(dù)可達3個RFU(空斑形(xíng)成單位(wèi))；在細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次性地將反應(yīng)液(yè)加好後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋上進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應。擴增產物一般用電泳(yǒng)分析，不一(yī)定要用(yòng)同位(wèi)素(sù)，無(wú)放射(shè)性汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度要(yào)求低(dī)
不需要分離病毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可作(zuò)為擴增模(mó)板。可直(zhí)接用臨(lín)床標本(běn)如(rú)血液(yè)，體腔液，洗嗽(sòu)液，毛發，細胞，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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