產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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螺杆菌(jūn)通(tōng)用PCR檢測(cè)試劑盒 |
Helicobacter spp.PCR |
YS-P014271 |
分(fēn)類：PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避(bì)免反復凍(dòng)融。
運輸：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期：一(yī)年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有效期一般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在適當的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分(fēn)的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
【結果分(fēn)析(xī)條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超過正(zhèng)常陰性質控(kòng)品擴增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的檢測結果(guǒ)應(yīng)為陽性，有明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值應小於等於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一(yī)次實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿足(zú)，否則(zé)該次實(shí)驗視(shì)為無效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯的指數(shù)擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本；對於可(kě)疑樣本建議(yì)復核一次(cì)，若(ruò)復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴增期(qī)，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng)，否則判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣品交叉汙(wū)染會出現假陽性(xìng)結果；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試劑配製不(bù)準確引(yǐn)起的試劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下(xià)降，可(kě)能會導致出現(xiàn)假陰性結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基因的特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守性(xìng)。
螺杆菌(jūn)通用PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引物與模(mó)板(bǎn)的正確(què)結合是關鍵。引物(wù)與模板的(dí)結合及引物鏈的(dí)延伸是遵循鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(hé)(復性(xìng))可以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度(dù)下(xià)進行，結合(hé)的(dí)特(tè)異性(xìng)大大(dà)增加，被擴增的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也就能保持(chí)很高(gāo)的正(zhèng)確度。再通過選擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保守性高(gāo)的靶基因區，其(qí)特異(yì)性(xìng)程度就更高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的生成量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式增加的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位(wèi))；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次(cì)性地將(jiāng)反應液加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴增液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退火-延伸反應，一(yī)般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不一(yī)定(dìng)要用(yòng)同位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染，易推廣。
(4) 對標本的純度要(yào)求低(dī)
不需要分離病(bìng)毒或細菌及培養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直(zhí)接用(yòng)臨床(chuáng)標本(běn)如血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發，細胞，活PCR技(jì)術概論。
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