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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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三(sān)綫(xiàn)鐮(lián)刀(dāo)菌(jūn)PCR檢測試劑(jì)盒 |
Fusarium tricinctumPCR |
YS-P014222 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避免反復(fù)凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有效期(qī)一般(bān)為(wéi)1年，這是(shì)指在適當的儲存(cún)溫度下。核酸擴增(zēng)部(bù)分的試劑一(yī)般要貯存於(yú)-20℃下，產物檢測部分(fēn)試劑則貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍融。
【結果(guǒ)分析條件(jiàn)設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的檢測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應(yīng)小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需(xū)在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該次實驗視(shì)為無效。
【結(jié)果判斷】
2.可疑：有明(míng)顯的指數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為可疑樣本；對於可疑樣本建議復(fù)核(hé)一(yī)次，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增(zēng)期，則判(pàn)定為陽性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為陰性樣本(běn)。
【對檢驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙染，樣品交叉汙染會出現假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存(cún)不當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製不準確(què)引起的試(shì)劑檢測(cè)效能下降(jiàng)，可能(néng)會導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特(tè)異性與保守(shǒu)性(xìng)。
三綫鐮(lián)刀菌(jūn)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒其(qí)中引物與模(mó)板的正確(què)結合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模板的結合及引物(wù)鏈的延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合成反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性，使反應中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結合(復性)可以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下(xià)進行，結(jié)合的特異性(xìng)大大增加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的正確度。再通過(guò)選(xuǎn)擇特異(yì)性和(hé)保守性(xìng)高的靶(bǎ)基因(yīn)區，其(qí)特異性程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物的生成量是(shì)以指數方式(shì)增(zēng)加的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞；在病毒的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單(dān)位)；在細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地將反應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應，一般在2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一(yī)定要用同位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度要求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分離病毒或細(xì)菌(jūn)及(jí)培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增模(mó)板。可(kě)直接(jiē)用臨床標本(běn)如(rú)血液，體(tǐ)腔液，洗嗽液(yè)，毛(máo)發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
