產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品名稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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馬(mǎ)虻PCR檢測試(shì)劑盒 |
Gasterophilus spp.PCR |
YS-P014228 |
分類：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有效期一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指在適(shì)當的儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試劑一般(bān)要(yào)貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢測(cè)部分試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值綫設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超過正(zhèng)常陰性(xìng)質控品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品的檢(jiǎn)測結(jié)果應為(wéi)陽性，有明顯的(dí)指數擴增期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需(xū)在一次實驗中同(tóng)時滿足(zú)，否則(zé)該(gāi)次實驗(yàn)視為無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑樣(yàng)本；對(duì)於可疑樣本建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次，若(ruò)復核結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期，則判定(dìng)為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判定為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙染會(huì)出現假陽性結果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保存不當或(huò)試劑(jì)配製不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效(xiào)能(néng)下(xià)降，可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異性(xìng)與保守(shǒu)性(xìng)。
馬虻(méng)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒其(qí)中引物與模板(bǎn)的正確結合(hé)是關(guān)鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)結合及引物鏈的延(yán)伸是(shì)遵循鹼基配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合成(chéng)反應的忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應中模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的結合(復(fù)性)可(kě)以在較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行，結(jié)合的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段也就能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的(dí)正確度。再通過選擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高的(dí)靶(bǎ)基因區，其特(tè)異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以指數(shù)方式增加的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測模(mó)板擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個細胞中檢出(chū)一個(gè)靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單位)；在細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次性地將(jiāng)反應液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴(yù)鍋上進行(háng)變(biàn)性-退火-延伸反(fǎn)應，一般在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增反應。擴增(zēng)產物(wù)一(yī)般用電泳分(fēn)析，不一(yī)定要用(yòng)同位(wèi)素，無放射性汙染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度要求低(dī)
不(bù)需要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可直接用臨(lín)床(chuáng)標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技術概論。
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