產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒
| 產品名稱 | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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豚鼠(shǔ)皰疹(zhěn)病毒PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Guinea Pig Herpes VirusPCR |
YS-P014246 |
分(fēn)類:PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件:-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún),避免反復凍融(róng)。
運(yùn)輸:低溫,避(bì)光(guāng)。
有效期(qī):一年(nián)
貨期:現貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有(yǒu)效期一般(bān)為1年(nián),這是指在適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增部分(fēn)的試(shì)劑一(yī)般要貯存(cún)於(yú)-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試劑則貯存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
u 閾值(Threshold)設定:將閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點。
2. 陽性質控品的(dí)檢測結果(guǒ)應為陽(yáng)性,有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī),Ct值(zhí)應小於(yú)等於35;
3. 以上要求(qiú)需在一次實驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足,否則(zé)該次實驗(yàn)視為無效。
2.可疑:有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,且(qiě)38≤Ct<40,此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本;對於(yú)可疑樣(yàng)本建議復核一次,若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期(qī),則判定(dìng)為陽性,否則判定(dìng)為陰性;
3. 陰(yīn)性:無(wú)指數擴增期(qī),Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰(yīn)性樣本。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn),試(shì)劑汙(wū)染(rǎn),樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出現(xiàn)假陽性結果;
2. 試劑運輸,保存不當或試劑(jì)配(pèi)製不準確引起的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效能下(xià)降,可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
②鹼基配(pèi)對原則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性;
④靶基(jī)因的特異(yì)性(xìng)與保守性。
豚(tún)鼠(shǔ)皰疹(zhěn)病(bìng)毒PCR檢測(cè)試劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物與模(mó)板的正確(què)結合(hé)是關(guān)鍵。引物(wù)與模板的(dí)結合及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼基配對原(yuán)則的(dí)。聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫性,使反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結合(復性)可以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的溫度下(xià)進(jìn)行(háng),結(jié)合(hé)的特異性大大(dà)增加,被擴(kuò)增的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段也(yě)就能保(bǎo)持很高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再通(tōng)過選擇特異性和保守性高的(dí)靶基因區(qū),其(qí)特(tè)異(yì)性程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物的生成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數方式增加(jiā)的(dí),能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個細胞中檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細胞(bāo);在病(bìng)毒的(dí)檢測(cè)中(zhōng),PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單(dān)位(wèi));在(zài)細菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便,快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合酶,一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加好後,即在(zài)DNA擴增(zēng)液和水浴鍋上(shàng)進(jìn)行變性(xìng)-退火-延伸反(fǎn)應(yīng),一般在2~4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增(zēng)產物一般用電(diàn)泳分(fēn)析,不(bù)一(yī)定要(yào)用(yòng)同位素,無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染,易推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純(chún)度要求低
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可直接用(yòng)臨床標本如(rú)血液,體腔液(yè),洗嗽液(yè),毛(máo)發(fā),細胞(bāo),活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
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