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PCR檢測試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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三(sān)代蟲PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒 |
Gyrodactylus salarisPCR |
YS-P014247 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試劑盒(hé)
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保存，避免(miǎn)反復(fù)凍融。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期(qī)一般為1年，這是(shì)指在(zài)適(shì)當的儲(chǔ)存溫度下。核酸(suān)擴增部分的(dí)試(shì)劑一般(bān)要貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結果(guǒ)分析條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好超(chāo)過正常陰性質控(kòng)品擴增曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高點。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測結(jié)果(guǒ)應為陽性，有明(míng)顯的指數擴增期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於35；
3. 以上要求需在(zài)一(yī)次實驗中(zhōng)同時滿足，否則(zé)該次實驗(yàn)視為無(wú)效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑樣本；對(duì)於可疑樣本(běn)建議復核一(yī)次(cì)，若復核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期，則判定(dìng)為(wéi)陽性，否則判定為陰性；
3. 陰性：無(wú)指數擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境(jìng)汙染，試劑汙染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保(bǎo)存不當(dāng)或試(shì)劑(jì)配製不(bù)準確(què)引起的(dí)試(shì)劑檢測效能(néng)下降，可能(néng)會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰性結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基因(yīn)的特異性與保守性。
三(sān)代(dài)蟲PCR檢測試劑盒其中(zhōng)引物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板的結合(hé)及引物鏈的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配對原(yuán)則的。聚合(hé)酶合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反應中模(mó)板與引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度下進行，結(jié)合的特異性大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增的(dí)靶基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就能保持(chí)很(hěn)高的正確度(dù)。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異性和(hé)保守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基因區(qū)，其特(tè)異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數方(fāng)式增加的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測模板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞；在病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的靈(líng)敏度可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位)；在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢出(chū)率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次性地將反應液加好(hǎo)後，即在DNA擴增液和水浴鍋上(shàng)進行(háng)變性(xìng)-退火-延伸(shēn)反應，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產物一般(bān)用(yòng)電泳分析，不一定要(yào)用(yòng)同位素，無放(fàng)射性汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度要求(qiú)低
不需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細菌(jūn)及培養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增模(mó)板。可直(zhí)接用臨床標(biāo)本如(rú)血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術(shù)概論(lùn)。
