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產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產品名(míng)稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
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撚轉血矛(máo)綫蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒 |
Haemonchus contortusPCR |
YS-P014248 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有效期：一年
貨期：現貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效期(qī)一般(bān)為1年，這(zhè)是指在適當的(dí)儲存溫度下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試劑(jì)一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測部(bù)分試(shì)劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量避免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果分析條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在剛好超(chāo)過正常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結果應為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期，Ct值應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一次(cì)實驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足，否(fǒu)則該次(cì)實驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指數(shù)擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建議復(fù)核一(yī)次(cì)，若復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期，則判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否則判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出現假(jiǎ)陽性結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存不當(dāng)或(huò)試劑配製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑檢測(cè)效能下降，可能(néng)會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的(dí)忠實(shí)性；
④靶基因(yīn)的特異(yì)性與保守性(xìng)。
撚轉(zhuǎn)血矛(máo)綫蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其中引物(wù)與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈的(dí)延(yán)伸是(shì)遵循鹼基配對原則的。聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫性，使反應(yīng)中(zhōng)模板與引物的結合(復性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高的溫度下進行，結合(hé)的特(tè)異(yì)性大大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增的靶基因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持(chí)很高的正確度(dù)。再通過(guò)選擇特(tè)異性(xìng)和保守性高(gāo)的靶基(jī)因區，其(qí)特(tè)異性程度就更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的生成量是以指數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個細胞中檢出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細菌學中zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次性地(dì)將反應(yīng)液加(jiā)好後，即(jí)在(zài)DNA擴增液(yè)和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延(yán)伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成(chéng)擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般用電泳分析(xī)，不一定(dìng)要用同位素(sù)，無放射性(xìng)汙染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純度要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨床標本如血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術概(gài)論。
