產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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流(liú)感嗜血杆(gān)菌型PCR檢測試劑盒 |
Haemophilus influenzae BBPCR |
YS-P014254 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期：一年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般為1年(nián)，這是指在(zài)適當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫度下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部分的(dí)試(shì)劑一(yī)般(bān)要貯存(cún)於-20℃下，產物(wù)檢測(cè)部分試劑則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫設定(dìng)在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過正常陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增曲綫的(dí)最高點(diǎn)。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控品的檢測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct值應(yīng)小於(yú)等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一(yī)次實(shí)驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足，否(fǒu)則該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯的指數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為可疑(yí)樣本(běn)；對於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復核一次，若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則判(pàn)定為陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰(yīn)性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存(cún)不當或試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效能(néng)下降(jiàng)，可能(néng)會導致(zhì)出現假陰性結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應的忠實性(xìng)；
④靶基因的(dí)特異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
流感嗜血杆菌型(xíng)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒其中引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模板的(dí)結合(hé)及引物鏈的(dí)延伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配對原則的。聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反應中(zhōng)模板與引物的(dí)結(jié)合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下進行，結(jié)合的特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加，被擴增的靶(bǎ)基因片段也就(jiù)能(néng)保持很高的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過選擇(zé)特異性和(hé)保守性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其特異性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數方式增加(jiā)的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出一個靶(bǎ)細(xì)胞；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為3個細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi)，一次(cì)性地(dì)將反應液加好後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴(yù)鍋上(shàng)進行變性-退火-延(yán)伸(shēn)反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增產物一般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不(bù)一定要用同(tóng)位素，無(wú)放(fàng)射性汙染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度(dù)要求低(dī)
不需(xū)要分離病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增模板。可直(zhí)接用臨(lín)床標(biāo)本如血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技術概(gài)論(lùn)。
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