產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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漢坦病型(xíng)PCR檢測試劑盒 |
Hantavirus 2(HV)2RTPCR |
YS-P014264 |
分類：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有效期：一年
貨(huò)期：現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有效期一般為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在適當(dāng)的儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的(dí)試(shì)劑一(yī)般要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分試(shì)劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析(xī)條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在剛好超過(guò)正常陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小於等(děng)於35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗中同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次(cì)實(shí)驗視為(wéi)無(wú)效。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可(kě)疑樣(yàng)本；對(duì)於可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一次，若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴(kuò)增期，則(zé)判(pàn)定為陽性(xìng)，否則(zé)判定(dìng)為陰性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境汙染，試劑(jì)汙染，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結果；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或(huò)試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準確引(yǐn)起的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出(chū)現假陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的特異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性。
漢坦病(bìng)型(xíng)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的正確(què)結合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與模(mó)板的(dí)結(jié)合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是(shì)遵循鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)的。聚合(hé)酶合成(chéng)反應的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反應中模板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(hé)(復性)可(kě)以在(zài)較高的(dí)溫(wēn)度下進(jìn)行，結合(hé)的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加，被擴增(zēng)的靶基因片(piàn)段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和保守性(xìng)高的靶(bǎ)基因區，其特異性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式(shì)增加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待測(cè)模板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞；在病毒(dú)的檢測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性地(dì)將反應液(yè)加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋上進行變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放射(shè)性汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對標本的純(chún)度(dù)要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概論。
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