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產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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沿(yán)岸單(dān)孢(bāo)子(zǐ)蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé) |
Haplosporidium costalePCR |
YS-P014266 |
分類：PCR檢測(cè)試劑盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分的(dí)試劑一(yī)般要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分試劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾值(zhí)綫設定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該次(cì)實(shí)驗視為無效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為可疑樣(yàng)本(běn)；對於可疑樣(yàng)本建議(yì)復核一(yī)次(cì)，若復(fù)核(hé)結果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則判(pàn)定為陽性，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環境(jìng)汙染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存不(bù)當(dāng)或試(shì)劑配製不準確(què)引起的試劑檢測(cè)效能下(xià)降，可(kě)能(néng)會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因的特異性(xìng)與保守性(xìng)。
沿岸(àn)單孢子蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模板的正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板的結合(hé)及(jí)引物(wù)鏈的(dí)延伸是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)的。聚合酶合成反應的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫(wēn)性，使(shǐ)反應(yīng)中模板(bǎn)與(yǔ)引物的結合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較高的溫度下進行，結(jié)合(hé)的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶基因片(piàn)段也(yě)就能保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確度。再通過選擇特異性(xìng)和保守(shǒu)性高的靶(bǎ)基(jī)因區(qū)，其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物的生成量是(shì)以指數(shù)方式增加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始待測(cè)模板(bǎn)擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水(shuǐ)浴鍋上進行(háng)變性-退火-延伸(shēn)反應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小時完(wán)成擴增反(fǎn)應。擴增產物(wù)一般(bān)用電泳(yǒng)分析，不(bù)一(yī)定要用同位素(sù)，無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純度(dù)要求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒或細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直接(jiē)用臨(lín)床標本(běn)如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞，活PCR技術概(gài)論(lùn)。
