產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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單孢子(zǐ)蟲(chóng)通用(yòng)PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
Haplosporidium spp.PCR |
YS-P014268 |
分類(lèi):PCR檢測試劑盒
儲存(cún)條(tiáo)件:-20℃避光保(bǎo)存,避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸:低(dī)溫,避(bì)光。
有(yǒu)效期:一年
貨期(qī):現貨PCR試劑盒的有效(xiào)期(qī)一般(bān)為1年,這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分的試劑一般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng):將閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超過正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點。
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢測結果(guǒ)應為陽性,有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期,Ct值應小於(yú)等於35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需在(zài)一次實(shí)驗中同時滿足(zú),否則該次實驗視(shì)為無效。
2.可(kě)疑(yí):有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期,且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本為可(kě)疑樣本;對(duì)於(yú)可疑樣本建議復核一次,若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增(zēng)期,則(zé)判定(dìng)為陽性(xìng),否則判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無指數擴增期,Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗室環境汙染,試劑(jì)汙(wū)染,樣(yàng)品交叉汙染會出現假陽性(xìng)結果;
2. 試劑(jì)運輸(shū),保存不(bù)當或(huò)試劑(jì)配製不(bù)準確引起(qǐ)的試(shì)劑檢測效(xiào)能(néng)下(xià)降,可能會導(dǎo)致出(chū)現假陰性結果。
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則;
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性;
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
單(dān)孢子(zǐ)蟲通用PCR檢測試(shì)劑盒其(qí)中引物(wù)與模(mó)板的正確結合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合(hé)及引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵循鹼基配對原則的。聚合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng),使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板與(yǔ)引物的(dí)結合(復性)可(kě)以在較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進行,結合的特(tè)異性大大增加,被擴(kuò)增的(dí)靶基因片段也就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高的正確度。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性和(hé)保(bǎo)守性高的(dí)靶基因(yīn)區,其特(tè)異(yì)性程(chéng)度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的(dí)生成量是以(yǐ)指(zhǐ)數方式增加(jiā)的(dí),能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待(dài)測模板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出(chū)一個(gè)靶細胞;在病毒(dú)的檢測中(zhōng),PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單(dān)位);在細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn),快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶,一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後,即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應(yīng),一般(bān)在2~4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴增產物一般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析(xī),不一定(dìng)要用同位(wèi)素(sù),無放射性(xìng)汙染,易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純(chún)度(dù)要求(qiú)低(dī)
不需要分離(lí)病毒(dú)或細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞(bāo),DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標本(běn)如血液(yè),體(tǐ)腔液,洗嗽液,毛發,細(xì)胞,活(huó)PCR技術概(gài)論。
- 上(shàng)一條(tiáo):哈(hā)特(tè)帕克病(bìng)毒(dú)PCR檢測試(shì)劑盒
- 下一條(tiáo):尼氏單孢子(zǐ)蟲PCR檢測試劑盒
