產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試劑(jì)盒
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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哈(hā)特帕克(kè)病毒PCR檢測試(shì)劑盒 |
Hart Park VirusRTPCR |
YS-P014269 |
分類:PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件(jiàn):-20℃避(bì)光(guāng)保存,避免反復凍(dòng)融。
運輸:低(dī)溫(wēn),避光。
有效(xiào)期(qī):一年
貨(huò)期:現貨(huò)PCR試劑盒的有效(xiào)期(qī)一般(bān)為(wéi)1年(nián),這是(shì)指在適當的儲存(cún)溫度下(xià)。核酸擴增部分(fēn)的試劑一般要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià),產物檢測(cè)部分(fēn)試劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設定在剛好超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增(zēng)曲(qū)綫的最高點。
2. 陽性質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽性(xìng),有明顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期,Ct值應(yīng)小於等於35;
3. 以上(shàng)要(yào)求需(xū)在一(yī)次實驗中同時滿足,否則(zé)該次實(shí)驗視為無效。
2.可疑(yí):有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī),且38≤Ct<40,此時(shí)樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣本(běn);對於可疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一次,若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),則判(pàn)定(dìng)為陽性(xìng),否則判定(dìng)為陰性;
3. 陰性:無指數擴增(zēng)期(qī),Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境(jìng)汙(wū)染(rǎn),試劑汙(wū)染(rǎn),樣品交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結(jié)果;
2. 試劑(jì)運輸,保存不當(dāng)或試劑(jì)配製不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下降,可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性結(jié)果。
②鹼基配對原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng);
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
哈特(tè)帕(pà)克病毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物與模板的(dí)正確結合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的(dí)結合及(jí)引物鏈(liàn)的延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對原則的。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng),使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引物的結(jié)合(復性)可(kě)以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行,結合(hé)的(dí)特異(yì)性大(dà)大增(zēng)加(jiā),被擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基因片段(duàn)也就能(néng)保持(chí)很高的(dí)正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇特(tè)異性(xìng)和保守性高(gāo)的靶基因(yīn)區,其特異性(xìng)程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成量是(shì)以指數方(fāng)式(shì)增(zēng)加(jiā)的,能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細胞;在病毒(dú)的檢測中,PCR的(dí)靈敏度(dù)可達3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位(wèi));在細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶,一次(cì)性地(dì)將反應(yīng)液加好(hǎo)後,即在DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進(jìn)行變性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應(yīng),一(yī)般在(zài)2~4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增產物一般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析,不一定要用同(tóng)位(wèi)素,無(wú)放射(shè)性(xìng)汙染,易推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度(dù)要求(qiú)低
不需要(yào)分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細菌及培養細(xì)胞,DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板。可直接(jiē)用臨床標(biāo)本如血液,體腔(qiāng)液(yè),洗(xǐ)嗽液,毛發,細胞,活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
