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PCR檢測試劑盒
鼠(shǔ)疫耶爾(ěr)森(sēn)菌(jūn)鼠疫杆(gān)菌PCR檢測試劑盒(hé)
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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鼠疫耶(yé)爾森菌(jūn)鼠疫(yì)杆(gān)菌(jūn)PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
Yersinia pestis()PCR |
YS-P014935 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避免反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一(yī)年
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有效期一般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是指(zhǐ)在適(shì)當的儲(chǔ)存溫度下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑(jì)一般要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復凍融。
【結果分析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設定在(zài)剛(gāng)好超過正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的檢(jiǎn)測結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在一次(cì)實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足(zú)，否則該(gāi)次實驗視為(wéi)無(wú)效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為可疑樣本；對於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復核一次(cì)，若復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增期(qī)，則判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否則判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗室環(huán)境汙(wū)染，試(shì)劑汙(wū)染，樣(yàng)品交叉汙染會出(chū)現假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試劑(jì)配製不準確(què)引起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降，可能(néng)會導致出現假陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的特異(yì)性與(yǔ)保守(shǒu)性。
鼠(shǔ)疫(yì)耶爾森菌(jūn)鼠(shǔ)疫杆(gān)菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中引(yǐn)物與模板的正(zhèng)確(què)結合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基配對原則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合成反應的(dí)忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高溫性，使反應中(zhōng)模板與引物(wù)的結(jié)合(hé)(復(fù)性)可以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的溫度下進行，結合(hé)的特異(yì)性大大(dà)增加，被擴增(zēng)的(dí)靶基因(yīn)片(piàn)段也(yě)就能(néng)保(bǎo)持很高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性和(hé)保守(shǒu)性高的靶(bǎ)基因(yīn)區，其(qí)特異性程(chéng)度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的生成量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單(dān)位)；在(zài)細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應液加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變性-退火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產物一般(bān)用(yòng)電泳分析，不一定要用同位(wèi)素，無放射(shè)性(xìng)汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的純度(dù)要求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或細(xì)菌及培養細胞，DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可作為擴(kuò)增模板。可(kě)直接(jiē)用臨床標本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發，細胞，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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