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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
肝(gān)胰(yí)腺(xiàn)細小(xiǎo)病毒(dú)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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肝胰腺(xiàn)細小病毒PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé) |
Hepatopancreatic Parvovirus(HPV)PCR |
YS-P014281 |
分類:PCR檢測試劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn):-20℃避光(guāng)保存,避免反復凍融。
運輸(shū):低(dī)溫(wēn),避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期:一年
貨期(qī):現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般為(wéi)1年(nián),這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的(dí)儲存溫度下(xià)。核酸(suān)擴增部分的(dí)試劑一般要(yào)貯存於(yú)-20℃下(xià),產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復(fù)凍融。
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng):將(jiāng)閾值(zhí)綫設(shè)定在剛(gāng)好超過正(zhèng)常陰性質控品擴增曲綫的最(zuì)高點。
2. 陽(yáng)性質控品的檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性(xìng),有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期(qī),Ct值應小於等(děng)於35;
3. 以上(shàng)要(yào)求需(xū)在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足,否(fǒu)則該(gāi)次實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
2.可疑:有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本;對於(yú)可疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核一(yī)次,若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增期,則判定為陽性(xìng),否則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng);
3. 陰性(xìng):無(wú)指數擴增期,Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染,試(shì)劑(jì)汙(wū)染,樣品交(jiāo)叉(chā)汙染會(huì)出現假陽性結果(guǒ);
2. 試劑運(yùn)輸,保存(cún)不當(dāng)或試(shì)劑配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的試劑檢測效能(néng)下(xià)降,可(kě)能(néng)會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性(xìng)結果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng);
④靶基因的(dí)特異性與保(bǎo)守性。
肝(gān)胰(yí)腺細小病毒(dú)PCR檢測試劑盒其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模板的(dí)正確結(jié)合是關鍵。引物(wù)與模(mó)板的(dí)結合(hé)及引物鏈(liàn)的(dí)延伸是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則的。聚合酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫(wēn)性(xìng),使反應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結合(復性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫度下進行,結(jié)合的(dí)特異(yì)性大(dà)大增加(jiā),被擴增的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片(piàn)段也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的(dí)正確度。再通過選擇特異性和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的靶基因區(qū),其(qí)特(tè)異性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量(liáng)是(shì)以指數(shù)方(fāng)式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待測(cè)模板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬個細胞中檢出(chū)一(yī)個靶細(xì)胞(bāo);在病毒(dú)的(dí)檢測中,PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成單位(wèi));在細菌學(xué)中zui小檢出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便,快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi),一次性地將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後(hòu),即在(zài)DNA擴增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng),一般(bān)在2~4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增產物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析(xī),不一(yī)定要用同位(wèi)素,無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染(rǎn),易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分離病毒或(huò)細菌及培(péi)養細胞,DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床標本如血液,體(tǐ)腔(qiāng)液,洗嗽液,毛(máo)發(fā),細(xì)胞(bāo),活(huó)PCR技術概論(lùn)。
