產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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狂(kuáng)犬病病毒通(tōng)用(yòng)PCR檢測試劑盒(hé) |
Rabies VirusRTPCR |
YS-P014662 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光保存，避免反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一年
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴增部分(fēn)的(dí)試劑(jì)一(yī)般(bān)要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值綫設定在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性質控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質控品的檢(jiǎn)測(cè)結果應(yīng)為陽性，有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中同時滿足(zú)，否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗視為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣本建(jiàn)議復(fù)核(hé)一(yī)次，若復核結果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定為陽性(xìng)，否則(zé)判定(dìng)為陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值均判定為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會(huì)出現假陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保(bǎo)存不(bù)當或試(shì)劑(jì)配製(zhì)不(bù)準確引(yǐn)起的試劑檢測(cè)效能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會(huì)導致出現(xiàn)假陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基(jī)因的特(tè)異性與保(bǎo)守(shǒu)性。
狂(kuáng)犬病(bìng)病毒(dú)通(tōng)用PCR檢測試劑盒其(qí)中引物(wù)與模板(bǎn)的正確(què)結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的結合及引(yǐn)物鏈的延伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原則的。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性，使反應中(zhōng)模板與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(hé)(復性(xìng))可以在較高的溫度下(xià)進(jìn)行，結合(hé)的(dí)特(tè)異性大大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段也就(jiù)能(néng)保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確(què)度。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性和保守(shǒu)性高的(dí)靶基因區，其特異性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的(dí)生成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式(shì)增加的(dí)，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢出(chū)一個靶細(xì)胞；在病(bìng)毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一次性地(dì)將反應液加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變(biàn)性-退火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不(bù)一定要用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度(dù)要求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒(dú)或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可直(zhí)接用臨(lín)床標本(běn)如血液，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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