產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產品名稱(chēng) | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
|
雞(jī)異(yì)刺綫(xiàn)蟲PCR檢測試劑(jì)盒 |
Heterakis gallinarumPCR |
YS-P014287 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存，避(bì)免(miǎn)反復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避光。
有效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有效期(qī)一般為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指在適當的儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸擴增部分(fēn)的試劑一(yī)般(bān)要貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測(cè)部分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果分析條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰性質控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果應為陽性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以上要求需(xū)在(zài)一次實驗(yàn)中同時(shí)滿足，否(fǒu)則該次實驗(yàn)視(shì)為無效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可疑樣本；對於可(kě)疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議復核一(yī)次，若復(fù)核結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出(chū)現假陽性結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸，保存(cún)不當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製不(bù)準確引起的試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效能下降，可(kě)能會導致(zhì)出現(xiàn)假陰性結果。
PCR反應的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異性(xìng)與保守(shǒu)性。
雞(jī)異(yì)刺綫(xiàn)蟲PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中(zhōng)引物與模板的正(zhèng)確(què)結合是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈的延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反應中(zhōng)模(mó)板與引物(wù)的結合(復性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫(wēn)度下進行，結合(hé)的特異(yì)性大(dà)大(dà)增加，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也就能保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確度。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和保(bǎo)守性高的靶(bǎ)基因區，其特(tè)異性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方(fāng)式增加的，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞；在病毒(dú)的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地將反應液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性-退火-延伸(shēn)反應(yīng)，一般(bān)在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增產物(wù)一般(bān)用電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一(yī)定要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需要分離病毒或細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模板。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術概論。
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