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PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
商品屬性(xìng)
| 產品名稱 | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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伊派病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
Ippy Virus(IPPYV)RTPCR |
YS-P014338 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光。
有效期：一年(nián)
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有效期一般(bān)為1年，這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分的試(shì)劑(jì)一般要貯存(cún)於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值綫設定在剛好(hǎo)超過正常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控品(pǐn)擴增曲(qū)綫的最(zuì)高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測結果應(yīng)為陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則該次實驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結(jié)果判斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣本建(jiàn)議復(fù)核(hé)一(yī)次，若復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增(zēng)期(qī)，則(zé)判定為(wéi)陽性，否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環境汙染，試(shì)劑汙染，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會出(chū)現假陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不當(dāng)或試劑配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能會(huì)導致出現假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特(tè)異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠(zhōng)實性；
④靶基因的特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守(shǒu)性。
伊派(pài)病(bìng)毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的正確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板(bǎn)的結合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的延伸是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則(zé)的。聚(jù)合酶合成(chéng)反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高溫(wēn)性(xìng)，使反應(yīng)中模板與(yǔ)引物的結(jié)合(復性(xìng))可以在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫度下進行(háng)，結合(hé)的特(tè)異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被擴增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能保持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通(tōng)過(guò)選擇特異性和(hé)保(bǎo)守性高的(dí)靶基(jī)因區，其特(tè)異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的生(shēng)成量(liáng)是以指數方式增加的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測模板擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形成單(dān)位)；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次性地將反應液加好後(hòu)，即在DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應(yīng)，一(yī)般(bān)在2～4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴增產物一般用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析，不一(yī)定(dìng)要(yào)用(yòng)同位(wèi)素，無放射性(xìng)汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度(dù)要求低
不(bù)需(xū)要分(fēn)離(lí)病毒或細(xì)菌及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及(jí)總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用臨床標本如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術概論(lùn)。
