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PCR檢(jiǎn)測試劑盒
同(tóng)山羊關節炎腦脊(jǐ)髓炎病(bìng)毒(dú)梅迪維(wéi)斯納病病毒(dú)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商品屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨號(hào) |
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同山羊關節炎腦脊(jǐ)髓炎(yán)病毒(dú)梅迪維斯(sī)納(nà)病病毒PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
MaediVisna Virus(MVV，)PCR |
YS-P014395 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún)，避免反(fǎn)復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有效期一般(bān)為(wéi)1年，這是指在適當的儲存溫度下。核(hé)酸擴增(zēng)部分(fēn)的試劑一般要貯(zhù)存於-20℃下，產物檢測部分試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結果分析條件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛好超(chāo)過正(zhèng)常陰(yīn)性質控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的檢測結(jié)果應為(wéi)陽性(xìng)，有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在(zài)一(yī)次實(shí)驗中同時滿(mǎn)足(zú)，否則該(gāi)次實驗視為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣本(běn)；對於(yú)可疑(yí)樣本(běn)建議(yì)復(fù)核一次(cì)，若(ruò)復核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增(zēng)期，則判定為陽(yáng)性，否則判定為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存(cún)不當或試劑配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確引起的(dí)試(shì)劑檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下降，可能(néng)會(huì)導致出現(xiàn)假陰性結果。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特(tè)異性(xìng)與保守(shǒu)性。
同(tóng)山(shān)羊(yáng)關節(jié)炎(yán)腦(nǎo)脊髓炎病(bìng)毒梅(méi)迪維(wéi)斯(sī)納(nà)病病毒PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中引物與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的結合及引物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸是遵循鹼基配對原則的。聚合(hé)酶合(hé)成反應的(dí)忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應中模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以在較高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行，結(jié)合(hé)的特異性大(dà)大(dà)增加(jiā)，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也就能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確度。再通過選擇特(tè)異(yì)性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性高(gāo)的靶基因區(qū)，其(qí)特異性(xìng)程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式增加的(dí)，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測模板(bǎn)擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中(zhōng)檢出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加好後，即在DNA擴增液(yè)和水浴鍋上進行變性(xìng)-退火-延(yán)伸反(fǎn)應，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分析，不一定(dìng)要用同位(wèi)素(sù)，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度要(yào)求低
不需(xū)要(yào)分離病毒或細菌(jūn)及(jí)培養細胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板。可直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標本如(rú)血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細胞，活PCR技術(shù)概論。
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