產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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轉輪蟹通(tōng)用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
Ixoides spp.PCR |
YS-P014342 |
分類(lèi):PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲存條(tiáo)件:-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún),避免反復(fù)凍融。
運輸:低(dī)溫(wēn),避光。
有(yǒu)效期:一年
貨期:現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有效期一(yī)般為1年,這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的儲(chǔ)存溫(wēn)度下。核酸擴增部分(fēn)的試劑一般(bān)要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下,產物檢測部分試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍融。
u 閾值(Threshold)設(shè)定:將閾(yù)值綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫的最高(gāo)點。
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結果應為陽性,有明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期,Ct值(zhí)應小於(yú)等於(yú)35;
3. 以上要(yào)求需在(zài)一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同時滿足,否則(zé)該次實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無(wú)效。
2.可(kě)疑(yí):有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本為可(kě)疑樣(yàng)本(běn);對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本建議復(fù)核(hé)一次,若復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴增期,則(zé)判定為陽(yáng)性,否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性;
3. 陰性(xìng):無(wú)指數(shù)擴增(zēng)期,Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境(jìng)汙染,試劑(jì)汙(wū)染(rǎn),樣品交叉汙染會(huì)出現假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ);
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū),保存(cún)不當(dāng)或(huò)試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確引起的試劑(jì)檢測效能下(xià)降(jiàng),可能會(huì)導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結果(guǒ)。
②鹼基(jī)配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應(yīng)的忠實性;
④靶基(jī)因(yīn)的特(tè)異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性。
轉輪(lún)蟹(xiè)通用(yòng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其中引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確結合(hé)是關鍵。引物與模板的(dí)結(jié)合及(jí)引物鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性,使(shǐ)反應(yīng)中模板(bǎn)與(yǔ)引物的結(jié)合(復性(xìng))可以在較(jiào)高的(dí)溫度下進行(háng),結合的(dí)特異(yì)性(xìng)大(dà)大增加,被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段也(yě)就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高的正(zhèng)確度。再通過(guò)選(xuǎn)擇特異性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性高的靶基(jī)因區,其(qí)特異性程(chéng)度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式增(zēng)加的(dí),能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢(jiǎn)出一(yī)個靶細(xì)胞;在(zài)病毒的檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位);在細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個細菌。
(3) 簡便,快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶,一(yī)次性地將反應(yīng)液加好後,即(jí)在DNA擴增液和水浴鍋上進(jìn)行(háng)變性-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應,一般在2~4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一(yī)般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析,不一定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素,無(wú)放射性汙(wū)染,易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低(dī)
不需(xū)要分離病毒或細菌(jūn)及培(péi)養細胞,DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可作為擴增模(mó)板。可(kě)直接用臨床標本如血液(yè),體(tǐ)腔液,洗嗽(sòu)液(yè),毛發(fā),細(xì)胞,活PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
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