產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱 | 英文名稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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羊肺(fèi)腺瘤病毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
Jaagsiekte Sheep Retrovirus(JSRV)RTPCR |
YS-P014343 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期(qī)一般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是指在適當的儲存溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸擴增部分(fēn)的(dí)試(shì)劑一般(bān)要(yào)貯存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部(bù)分試劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
【結果分析條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過正常陰性(xìng)質控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最高點。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應為陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小於等於35；
3. 以上要(yào)求需在一次實驗中(zhōng)同時滿足，否(fǒu)則(zé)該次實(shí)驗(yàn)視(shì)為無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本建議復(fù)核一次(cì)，若復核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指數擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保存不(bù)當或試(shì)劑(jì)配(pèi)製不準確引起的試劑(jì)檢測效(xiào)能下(xià)降，可能(néng)會導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性結(jié)果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性(xìng)與保守性。
羊肺(fèi)腺瘤(liú)病(bìng)毒(dú)PCR檢測試劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模板的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關鍵。引(yǐn)物與模板的結(jié)合(hé)及引物(wù)鏈的(dí)延伸(shēn)是遵循鹼基配對(duì)原則(zé)的(dí)。聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高溫性，使反應中模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(復性)可以在較高(gāo)的(dí)溫度下進行(háng)，結合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性大(dà)大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增的靶基因片段(duàn)也就能保持(chí)很高的正確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇特異(yì)性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基因區，其特異性程(chéng)度就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待(dài)測模板擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度(dù)可達3個RFU(空斑(bān)形成單位)；在細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次(cì)性地(dì)將反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行(háng)變性-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用電泳分(fēn)析，不(bù)一定要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無(wú)放射(shè)性汙染，易推廣。
(4) 對標本的純度要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要(yào)分離病毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床標(biāo)本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗嗽(sòu)液，毛發，細胞(bāo)，活PCR技術概論。
