產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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沙(shā)氏住白細胞(bāo)原蟲(chóng)PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
Leucocytozoon sabrezisPCR |
YS-P014376 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試劑盒的有效期一般為1年，這(zhè)是(shì)指在適當的儲存溫度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部分的(dí)試劑(jì)一般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產物檢測部分(fēn)試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在剛(gāng)好(hǎo)超過正常(cháng)陰(yīn)性質控品擴增(zēng)曲(qū)綫的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等於35；
3. 以上(shàng)要求需在(zài)一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿足，否(fǒu)則該次(cì)實驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為可(kě)疑(yí)樣本；對於可疑(yí)樣本(běn)建議(yì)復核一(yī)次，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴增期，則(zé)判定為陽性，否(fǒu)則判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會(huì)出現假陽性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保存(cún)不當(dāng)或試劑配製不(bù)準確(què)引(yǐn)起的試劑檢測效(xiào)能下降，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結(jié)果。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼(jiǎn)基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因的特異性與保(bǎo)守性。
沙氏住白(bái)細胞原蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其(qí)中引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈的延伸是遵(zūn)循鹼基配對(duì)原則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使(shǐ)反應中模板與引(yǐn)物的結(jié)合(復性(xìng))可以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行，結合的特異(yì)性大大增加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基因片(piàn)段也(yě)就能保(bǎo)持很高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通過(guò)選擇特(tè)異(yì)性和保守性高的靶(bǎ)基因區(qū)，其特異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成量是以指(zhǐ)數(shù)方式增加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測(cè)模(mó)板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的(dí)檢測中，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單位(wèi))；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴鍋(guō)上(shàng)進行變性-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反應，一般在2～4 小(xiǎo)時完成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產物一(yī)般(bān)用電泳分析，不(bù)一定要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無(wú)放射(shè)性汙染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標本的(dí)純度要求(qiú)低
不需要分離(lí)病(bìng)毒或細(xì)菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及總RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模(mó)板。可直(zhí)接(jiē)用臨床標(biāo)本(běn)如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術(shù)概論(lùn)。
