產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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卡(qiǎ)氏住白(bái)細(xì)胞原蟲PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Leucocytozoon caulleryiPCR |
YS-P014375 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
儲存條件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避光。
有(yǒu)效期：一年
貨(huò)期：現貨PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般(bān)為1年，這(zhè)是指在(zài)適當的(dí)儲存溫(wēn)度下(xià)。核酸擴(kuò)增部(bù)分的試(shì)劑一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設定在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性質控品的檢(jiǎn)測結(jié)果應為(wéi)陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應小於(yú)等於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時滿足，否則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可(kě)疑樣本(běn)；對於可疑(yí)樣本建議復核(hé)一次，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增期，則判定(dìng)為陽性(xìng)，否則(zé)判定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定為陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不當(dāng)或試劑(jì)配製不準確引起的(dí)試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效能下降，可(kě)能會導(dǎo)致出現假陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基(jī)因的特異性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
卡(qiǎ)氏(shì)住(zhù)白細(xì)胞原蟲(chóng)PCR檢測試(shì)劑盒其(qí)中(zhōng)引物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合(hé)是(shì)關鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的結(jié)合及(jí)引物鏈的延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在較高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進行，結合(hé)的特異(yì)性大(dà)大(dà)增加(jiā)，被擴增的靶基因片段(duàn)也就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的正(zhèng)確度。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇(zé)特異性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基因(yīn)區，其特(tè)異(yì)性程度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是(shì)以指數方(fāng)式增(zēng)加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行(háng)變性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應(yīng)，一般在(zài)2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產物一般(bān)用電泳(yǒng)分析(xī)，不一定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無放(fàng)射性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標本的純度(dù)要(yào)求低
不(bù)需要(yào)分離病(bìng)毒或細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可(kě)作為(wéi)擴增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床標本如血(xiě)液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞，活PCR技術概(gài)論。
