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PCR檢測試劑盒
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨號 |
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羅布羅布芽生菌(jūn)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
Loboa lobaiPCR |
YS-P014381 |
分類:PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲存條(tiáo)件(jiàn):-20℃避光保存(cún),避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸:低溫(wēn),避光。
有效期(qī):一(yī)年
貨期(qī):現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的有效(xiào)期一般為1年(nián),這是指(zhǐ)在適當的儲存溫度(dù)下。核酸(suān)擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般(bān)要貯(zhù)存(cún)於-20℃下,產(chǎn)物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的最高點。
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應為陽(yáng)性(xìng),有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct值應(yīng)小於等於(yú)35;
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足(zú),否則(zé)該次實驗視為無效。
2.可(kě)疑(yí):有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本;對於可疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核(hé)一(yī)次(cì),若復核結果Ct<40且有指數擴(kuò)增期,則(zé)判定(dìng)為陽性(xìng),否則判(pàn)定為陰性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無指數擴增期,Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對檢驗結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境汙(wū)染(rǎn),試劑汙(wū)染(rǎn),樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果;
2. 試劑(jì)運輸(shū),保存不當(dāng)或(huò)試劑配(pèi)製不準確(què)引起(qǐ)的試劑檢測(cè)效能下降(jiàng),可(kě)能會導致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結果(guǒ)。
②鹼基配對原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反應的忠實性(xìng);
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
羅(luó)布羅布(bù)芽(yá)生菌PCR檢測試劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的正確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈的延(yán)伸是(shì)遵循鹼基配對原則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高溫(wēn)性,使反(fǎn)應中模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物的結合(hé)(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較(jiào)高的溫度下進行,結合的特異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加,被(bèi)擴增的靶基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高的正(zhèng)確(què)度。再(zài)通過選擇特(tè)異性和保守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基因區,其(qí)特異性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的生(shēng)成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指數方式增加的(dí),能將皮克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待(dài)測模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞中檢出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞(bāo);在(zài)病毒的檢(jiǎn)測中(zhōng),PCR的靈(líng)敏度可達3個RFU(空(kōng)斑形成單位);在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn),快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應液加(jiā)好後,即在DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴(yù)鍋上進行變性-退(tuì)火-延伸反應,一(yī)般(bān)在(zài)2~4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用(yòng)電泳分析,不一定要(yào)用同位素(sù),無(wú)放射(shè)性(xìng)汙(wū)染,易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的(dí)純度(dù)要求(qiú)低
不需要(yào)分(fēn)離病毒(dú)或細菌及培(péi)養細胞(bāo),DNA 粗(cū)製品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增模板。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床標本如(rú)血液,體腔液,洗(xǐ)嗽液(yè),毛發,細胞(bāo),活PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
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