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PCR檢測試(shì)劑盒
商品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 規格 | 貨號(hào) |
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玉(yù)米(mǐ)S/MS RT-PCR檢測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015308 |
儲存條件：-20℃避光保存(cún)，避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低溫，避(bì)光。
有效(xiào)期：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期(qī)一般(bān)為1年，這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的儲(chǔ)存溫(wēn)度下(xià)。核酸擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一般(bān)要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部分試劑則貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定在(zài)剛好超(chāo)過正常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品的檢(jiǎn)測結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小於等於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需在一(yī)次(cì)實驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗(yàn)視為無效。
【結(jié)果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對於(yú)可疑樣本(běn)建(jiàn)議(yì)復核一次，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴增期(qī)，則(zé)判(pàn)定為陽性(xìng)，否則判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙染，試劑汙染，樣品交叉汙染(rǎn)會出(chū)現假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存不當或試劑(jì)配製不(bù)準確引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出(chū)現假(jiǎ)陰性結果。
PCR反應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特(tè)異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
玉米S/MS RT-PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結合是關鍵。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引物鏈(liàn)的(dí)延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板與引物的(dí)結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫(wēn)度下(xià)進行，結(jié)合(hé)的特異(yì)性大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶基因片段(duàn)也(yě)就能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高的正(zhèng)確度。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異(yì)性(xìng)和保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶基因(yīn)區，其(qí)特異性程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的(dí)生成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方式增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度可(kě)達3個RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位)；在細(xì)菌學中zui小檢出(chū)率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次性地(dì)將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反應，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用電泳分(fēn)析(xī)，不一(yī)定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無放射(shè)性汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要(yào)求低
不需要分離(lí)病(bìng)毒或細菌(jūn)及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為擴增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔液，洗嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術概(gài)論。
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