產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名稱(chēng) | 英文名稱 | 貨(huò)號 |
|
疙瘩皮膚病病(bìng)毒(dú)PCR檢測試劑盒 |
Lump Skin Disease Virus(LSDV)PCR |
YS-P014384 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún)，避(bì)免(miǎn)反復凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有效期：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為1年，這是指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫度(dù)下。核酸擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存(cún)於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果分析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超過正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質控品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應為陽性(xìng)，有明顯的指數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需(xū)在(zài)一次(cì)實(shí)驗中同時滿(mǎn)足，否則(zé)該(gāi)次實(shí)驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑(yí)樣(yàng)本；對於可(kě)疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增(zēng)期(qī)，則判定(dìng)為陽性，否(fǒu)則判定為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境(jìng)汙染，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試(shì)劑運輸，保(bǎo)存(cún)不(bù)當或試劑(jì)配(pèi)製不準確引(yǐn)起的(dí)試劑(jì)檢測(cè)效能下降，可(kě)能(néng)會(huì)導致出現假陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異性與(yǔ)保(bǎo)守性。
疙瘩皮膚(fū)病病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模板的正確結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板的結(jié)合(hé)及引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是遵循鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)的。聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性，使反應中模板與引(yǐn)物的(dí)結合(復(fù)性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的特異(yì)性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被擴(kuò)增的靶基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持很高的正確度。再通過選(xuǎn)擇特異(yì)性和保(bǎo)守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基因區(qū)，其特異(yì)性程(chéng)度就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬(wàn)個細胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個靶細胞(bāo)；在(zài)病毒(dú)的檢測中，PCR的靈(líng)敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在細(xì)菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應液加好(hǎo)後，即在DNA擴增(zēng)液和水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反應，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時完成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增產物一般用電泳分析，不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無放射性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純度(dù)要求(qiú)低
不需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均可(kě)作(zuò)為擴增模板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發，細胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
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